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【目的】从7种草珊瑚内生真菌中筛选出具有广谱抑菌活性的菌株。【方法】采用菌丝生长速率法和最低抑制浓度法对7种草珊瑚内生真菌的发酵产物进行抑菌活性测定。【结果】7株草珊瑚内生真菌中，J-10较其余菌株不同溶剂萃取层对供试致病菌株表现出广谱的抑菌活性，其甲醇和乙酸乙酯萃取物在质量浓度为2 mg·mL-1时对罗汉果根腐病菌和甘蔗凤梨病菌抑菌率介于84.84%～88.51%。J-10为拟可可毛球二孢菌，其发酵产物的乙酸乙酯萃取物抑菌活性最为显著，对7种病原真菌的EC50值介于0.199 5～1.172 2 mg·mL-1，其中对玉米大斑病菌的毒力最强，对罗汉果根腐病菌的毒力最弱；J-10菌丝体甲醇提取物对7种病原真菌的EC50值介于0.125 5～9.468 7mg·mL-1，对茶轮斑病菌的毒力最强，对罗汉果根腐病菌的毒力最弱。同时，其乙酸乙酯萃取物对普通变形杆菌、伤寒沙门氏菌、罗汉果青枯菌、大肠杆菌、溶壁微球菌、蜡样芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、炭疽杆菌、藤黄微球菌、金黄色葡萄球菌11种致病细菌的抑菌效果优于甲醇和正丁醇萃取物，经24 h处理后的MIC介于0.125～2.5 mg·mL-1。【结论】拟可可毛球二孢菌具有抑菌广谱性，活性物质主要集中于乙酸乙酯萃取物中，属于中等极性。