【摘 要】
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首先通过多序列比对分析不同血清型菌株GAPDH的一级结构保守性,然后使用在线软件Bepipred-2.0预测巴氏杆菌GAPDH线性B细胞表位,并通过人工化学合方式合成GAPDH表位对应的多肽.最后使用间接ELISA法检测这些多肽与巴氏杆菌GAPDH高免血清之间的反应,确认预测结果.研究发现,不同血清型菌株的GAPDH一级结构高度保守,只有D型菌株HN06发生A288T突变.本次试验预测到巴氏杆菌GAPDH的3个表位,ELISA检测结果表明177HATTATQKTVDGPSAKDWRGGRGAAQNIIPS
【机 构】
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江苏省农业科学院兽医研究所,南京 210014;农业农村部兽用生物制品工程技术重点实验室,南京210014;国家兽用生物制品工程技术研究中心,南京 210014;华中农业大学动物医学院,武汉 4300
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首先通过多序列比对分析不同血清型菌株GAPDH的一级结构保守性,然后使用在线软件Bepipred-2.0预测巴氏杆菌GAPDH线性B细胞表位,并通过人工化学合方式合成GAPDH表位对应的多肽.最后使用间接ELISA法检测这些多肽与巴氏杆菌GAPDH高免血清之间的反应,确认预测结果.研究发现,不同血清型菌株的GAPDH一级结构高度保守,只有D型菌株HN06发生A288T突变.本次试验预测到巴氏杆菌GAPDH的3个表位,ELISA检测结果表明177HATTATQKTVDGPSAKDWRGGRGAAQNIIPSSTGA211与GAPDH高免血清反应明显,是巴氏杆菌GAPDH的表位.本研究鉴定到了巴氏杆菌GAPDH的1个线性B细胞表位,这些表位将为以后基于巴氏杆菌GAPDH表位的诊断、疫苗设计及感染与免疫机制研究提供技术基础.
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