脑特异性分子标志物vsnl1基因的克隆及原核表达

来源 :扬州大学学报(农业与生命科学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户：joeybaobao

【摘要】

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从健康BALB／c小鼠脑组织提取总RNA，逆转录获得cDNA。根据GenBank公布的视锥蛋白样基因1（vsnl1）基因序列设计引物，以鼠脑cDNA为PCR模板扩增vsnl1。将目的片段克隆至pMD18-T载体，经酶

【作者】

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褚澄薛利军赵忠新

【机构】

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第二军医大学长征医院,扬州市第一人民医院,南京军区南京总医院

【出处】

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扬州大学学报(农业与生命科学版)

【发表日期】

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2008年2期

【关键词】

：

脑分子标志物 vsnl1基因克隆原核表达 brain biomarker visinin-like 1 cloning prokaryotic e

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从健康BALB／c小鼠脑组织提取总RNA，逆转录获得cDNA。根据GenBank公布的视锥蛋白样基因1（vsnl1）基因序列设计引物，以鼠脑cDNA为PCR模板扩增vsnl1。将目的片段克隆至pMD18-T载体，经酶切和测序鉴定重组质粒pMDT—v。将vsnl1基因亚克隆至6×His原核表达载体pROEX-HTb，转化大肠杆菌DH5α，用IPTG诱导表达和Ni-NTA柱纯化，并采样进行SDS—PAGE分析。结果表明：RT-PCR扩增产生了与vsnl1大小吻合的目的片段，测序及BLAST比对提示与

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