恶性疟原虫疫苗研究──Ⅸ.主要裂殖子表面蛋白1C端类表皮生长因子1的体外扩增及克隆

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恶性疟原虫主要裂殖子表面蛋白1(MSP1)在其分子C-端MPS-119具有两个类EGF结构,其中类EGF-1为特异性抗体抑制疟原虫侵入红细胞的靶位之一。本文通过酚-氯仿抽提,乙醇沉淀法提取恶性疟原虫(FCC-1HN株)基因组DNA,再用PCR扩增类EGF-1基因,经酶切纯化后插入质粒pGEM3Zf(+)中,转化大肠杆菌DH5a,经PCR筛选及双酶切鉴定,筛选出含类EGF-1基因的阳性克隆子。 Plasmodium falciparum major merozoite surface protein 1 (MSP1) has two EGF-like structures at its C-terminal MPS-119, of which EGF-1 is a specific antibody that inhibits the entry of Plasmodium into the erythrocytes. In this paper, the genomic DNA of Plasmodium falciparum (FCC-1HN strain) was extracted by phenol-chloroform extraction and ethanol precipitation. The EGF-1 gene was amplified by PCR and inserted into the plasmid pGEM3Zf (+ Bacillus DH5a, screening by PCR and double enzyme digestion, screened EGF-1 gene-containing positive clones.
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