【摘 要】
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目的 制备SARS冠状病毒(SARS-CoV)N蛋白特异性单克隆抗体(McAb),为SARS的快速诊断及致病机制的研究提供实验材料.方法用纯化的重组SARS-CoV N蛋白免疫BALB/c小鼠,经细胞融合和亚克隆后获得分泌针对N蛋白的杂交瘤细胞株,用Western blot和间接免疫荧光法检测这些细胞株分泌的单克隆抗体特异性,并将N蛋白分3段表达初步定位单克隆抗体识别表位所在区域.结果通过细胞融合
【机 构】
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100052,北京,中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所形态室,山西医科大学与中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所形态室联合培养研究生,100052,北京,中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所形态室,
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目的 制备SARS冠状病毒(SARS-CoV)N蛋白特异性单克隆抗体(McAb),为SARS的快速诊断及致病机制的研究提供实验材料.方法用纯化的重组SARS-CoV N蛋白免疫BALB/c小鼠,经细胞融合和亚克隆后获得分泌针对N蛋白的杂交瘤细胞株,用Western blot和间接免疫荧光法检测这些细胞株分泌的单克隆抗体特异性,并将N蛋白分3段表达初步定位单克隆抗体识别表位所在区域.结果通过细胞融合和3轮克隆化,筛选出分泌抗N蛋白的6个杂交瘤细胞株.Western blot及免疫荧光显示,获得的McAb可与SARS-CoV N蛋白及SARS-CoV发生特异性反应,有4个细胞株分泌的抗体的识别位点位于N蛋白N端,2个位于C端.结论获得了SARS-CoV特异性单克隆抗体并进行了初步定位,可用于SARS的早期诊断及致病机制研究。
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