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【摘 要】目的：通过观察干燥综合征患者心、肺功能的变化与外周血CD19+CD24+Brge及BTLA表达的变化，探讨干燥综合征患者心、肺功能的异常与CD19+CD24+Brge及BTLA的关系。方法：采用超声心动图（UCG）检测64例干燥综合征患者（干燥综合征组）心功能变化，采用肺功能仪检测干燥综合征患者肺功能，采用流式细胞术检测外周血CD19+CD24+Brge及BTLA的表达频率，并与20例健康体检正常者（对照组）进行比较。结果：①干燥综合征组与对照组多普勒超声异常率比较，干燥综合征组多普勒超声心功能变化检测结果异常率为63.33%，对照组异常率为10.00%；干燥综合征组肺功能变化检测结果异常率为79.68%，对照组异常率为20.00%。两组比较，差异有统计学意义（P < 0.01）。②与对照组比较，干燥综合征组心功能参数E峰、FS%、E/A比值均显著降低（P < 0.01），A峰、LADd显著升高（P < 0.01）。③与对照组比较，干燥综合征组肺功能指标IC、MVV、FEF25、FEF50、FEF75、PEF均明显降低（P < 0.05或P < 0.01）。④与对照组比较，干燥综合征组外周血BTLA占淋巴细胞比例明显降低（P < 0.01），CD19+表达频率、CD24+表达频率、CD19++CD24+表达频率、CD19++BTLA占淋巴细胞比（%）、CD24++CD19+占淋巴细胞比（%）、CD24++BTLA占淋巴细胞比（%）显著升高（P < 0.01）。⑤Spearman相关分析结果显示，干燥综合征患者心、肺功能与BTLA占淋巴细胞比（%）呈明显的负相关（P < 0.05），E峰、LADd、PEF与CD19+表达频率、CD24+表达频率、CD19++BTLA占淋巴细胞比（%）、CD24++CD19+占淋巴细胞比（%）、CD24++BTLA占淋巴细胞比（%）均呈显著负相关（P < 0.05）；肺功能参数FEV1、FEF50与CD19+表达频率、CD24+表达频率、CD19++BTLA占淋巴细胞比（%）、CD24++CD19+占淋巴细胞比（%）呈显著正相关（P < 0.05）。结论：干燥综合征患者在发生炎症的同时，其心、肺功能水平呈下降趋势，同时与外周血BTLA表达降低及CD19+CD24+Brge表达的升高呈相关性，提示Breg调控作用增强，引起免疫失衡，可导致心肺功能的下降。
【关键词】 干燥综合征；心功能；肺功能；CD19+CD24+Brge；BTLA
风湿病是侵害结缔组织和不同器官系统组织的一组疾病。心、肺两脏因富含血管、结缔组织常易被累及，导致心、肺功能下降，严重影响患者预后及生活质量。干燥综合征（sj?gren's syndrome，SS）是风湿病的一种，通过临床观察发现，SS患者在出现口干、眼干症状的同时，常伴有心慌、胸闷等表现，且随着干燥严重程度的增加而愈加明显。SS是一种慢性炎症性自身免疫性疾病，其确切病因和发病机制尚不明确，近年来研究[1-4]认为，T淋巴细胞的免疫失调及其介导的B淋巴细胞的免疫异常在其中发挥着关键作用，可能与细胞免疫特别是调节性B细胞的数量或功能异常有关。本文旨在通过观察干燥综合征患者心肺功能、外周血CD19+CD24+Brge及BTLA表达的变化及进行相关性分析，从而初步探讨SS心、肺功能变化的机制。
1 临床资料
1.1 一般资料 选取2012年1月至2013年4月在安徽中医药大学第一附属医院就诊的住院SS患者64例（定义为SS组），男1例，女63例；年龄31～73岁，平均（55.26±12.38）岁；病程最短6个月，最长17年，平均（6.21±4.43）年。另设对照组20例，男5例，女15例；年龄21～52岁，平均（28.5±10.4）岁；均来自安徽中医药大学第一附属医院体检中心，经体检和免疫学检查排除自身免疫性疾病，均为身体健康、无明显器质性疾病者。两组在年龄、性别等方面比较，差异无统计学意义（P > 0.05），具有可比性。
1.2 纳入标准 ①患者符合2002年制订的干燥综合征国际分类（诊断）标准[5]；②所有研究对象均通过本院伦理审查委员会审批，愿意并签署知情同意书。
1.3 排除标准 ①颈头面部放疗史，丙肝病毒感染，AIDS，淋巴瘤，结节病，GVH病，抗乙酰胆碱药的应用（如阿托品、莨菪碱、溴丙胺太林、颠茄等）；②合并有肝、肾和造血系统等严重原发性疾病者；③发病前有精神障碍家庭史和发病后有意识障碍的患者；④妊娠及哺乳期妇女。
1.4 试剂和仪器 单克隆抗体组合PE-BTLA、PE-CYTM5-CD19，FITC-CD24、红细胞裂解液、Cal-iBRITE beads三色荧光微球，美国BectonDickison公司产品。FACSCalibu流式细胞仪，美国Beckon Dickinson公司产品；Avdia-120型血细胞分析仪，美国Bayer公司产品；HERMLE-Z383K型离心机，德国 HERMLE公司产品。
2 方 法
2.1 心功能测定 运用美国GE VIVID 7超声诊断仪，探头频率为2～5 MHz。患者取左侧卧位，平静呼吸，分别在胸骨旁和心尖切面部获取常规切面，观察左室腔的大小、心内膜的回声以及有无增厚，测量左室后壁（LVPW）的厚度。同时测量左心房舒张末期内径（LADd）、左心室舒张末期内径（LVDd），左心室射血分数（LVEF）和左心室内径缩短率（FS，%）。检测舒张期左房室瓣血流频谱获得左室舒张早期血流峰值流速（E峰）、左心室舒张晚期血流峰值流速（A峰）、舒张早期血流峰值速度/舒张晚期血流峰值速度（E/A）。所有指标均连续测量3次，取平均值，超声检查的操作及分析均由高年资的专业超声医师完成。
2.2 肺功能测定 采用德国Jager MasterScreen自动肺功能检测仪，检测项目有深吸气量（IC）、最大通气量（MVV）、用力肺活量（FVC）、第1秒用力呼气容积（FEV1）、用力呼吸1秒率（FEV1/FEV）、25%肺活量位的最大呼气流量（FEF25）、50%肺活量位的最大呼气流量（FEF50）、75%肺活量位的最大呼气流量（FEF75）和最大呼气流量（PEF）。为了消除性别、年龄、身高、体质量等因素对肺功能测定值的影响，以上参数均以实测值/正常预计值（%）表示，各参数皆以实测值/正常预计值< 80%为异常。 2.3 样本采集 分别取两组治疗前后的外周静脉血2 mL，抗凝，分别取100 μL血液（白细胞约为1×106个·100 μL-1）加入空白干燥试管中，按采集顺序编号。
2.4 检测方法 在干燥试管加入PE-BTLA ，FITC-CD24 20 μL和PE-CYTM5-CD19 20 μL。在4 ℃条件下避光放置30 min。染色后在室温下分别加入去离子水1∶10稀释的红细胞裂解液2 mL，避光15 min。裂解后将试管分别于1 500 r·min-1离心机离心3 min，弃去上清液，即得白细胞沉淀。将白细胞沉淀使用生理盐水洗涤2次，分别于1 500 r·min-1离心机离心3 min，循环离心2次，最后澄清的沉淀分别加入质量分数4%多聚甲醛600 μL制成单细胞悬液，运用FACSComp软件进行上机分析。
2.5 统计学方法 采用SPSS 17.0软件进行统计分析。计量资料以表示，两组间的比较采用独立样本t检验，各指标之间关系采用Pearson相关性分析。以P < 0.05为差异有统计学意义。
3 结 果
3.1 两组心、肺功能异常率比较 见表1。
3.2 两组心功能比较 与对照组比较，SS组心功能参数E峰、FS，%、E/A比值均显著降低（P < 0.01），A峰、LADd显著升高（P < 0.01）。见表2。
3.3 两组肺功能比较 与对照组比较，SS组患者肺功能指标IC、MVV、FEF25、FEF50、FEF75、PEF均明显降低（P < 0.05或P < 0.01）。见表3。
3.4 两组外周血CD19+CD24+Brge及BTLA比较 与对照组比较，SS组患者外周血BTLA占淋巴细胞比例明显降低（P < 0.01），CD19+表达频率、CD24+表达频率、CD19++CD24+表达频率、CD19++BTLA占淋巴细胞比（%）、CD24++CD19+占淋巴细胞比（%）、CD24++BTLA占淋巴细胞比（%）显著升高（P < 0.05）。见表4。
3.5 SS组心、肺功能与CD19+CD24+Brge及BTLA的相关性分析 Spearman相关分析结果显示，SS组患者心、肺功能与BTLA占淋巴细胞比（%）呈明显的负相关（P < 0.05）。心功能参数FS峰与CD19+表达频率、CD19++BTLA占淋巴细胞比（%）呈显著正相关（P < 0.05）。E峰、LADd、PEF与CD19+表达频率、CD24+表达频率、CD19++BTLA占淋巴细胞比（%）、CD24++CD19+占淋巴细胞比（%）、CD24++BTLA占淋巴细胞比（%），均呈显著负相关（P < 0.05）。肺功能参数FEV1、FEF50与CD19+表达频率、CD24+表达频率、CD19++BTLA占淋巴细胞比（%）、CD24++CD19+占淋巴细胞比（%），呈显著正相关（P < 0.05）。FEF75与CD19+表达频率、CD24+表达频率，呈显著正相关（P < 0.05）；与CD19++BTLA占淋巴细胞比（%）、CD24++CD19+占淋巴细胞比（%）、CD24++BTLA占淋巴细胞比（%），呈显著负相关（P < 0.05）。见表5。
4 讨 论
SS可引起患者腺体上皮细胞活化和细胞凋亡诱导T、B细胞活化和局部浸润，产生多种炎性介质和细胞因子，从而引起腺体破坏。在SS患者中，T淋巴细胞相对减少，而B淋巴细胞数量增多。B细胞的表现：被激活的腺上皮细胞微环境对浆细胞的分化和局部IgA的合成起到了作用。在SS患者的唾液腺中发现大量IgA型抗SS抗体，提示局部的免疫球蛋白合成增强[6]。B细胞在抗原刺激下可分化为浆细胞，合成和分泌免疫球蛋白，主要执行机体的体液免疫。CD19+是一种属于Ig超家族成员、分子量为95 000的穿膜糖蛋白，分布于B细胞表面。近年来，B淋巴细胞在SS中的作用越来越被重视，如B细胞克隆性增殖、B淋巴细胞刺激因子诱导B细胞增殖和活化及以B细胞为靶向治疗SS等。这些研究让人们对SS的发病机制和治疗有了更深的认识[7]。CD24是染色体6q21基因编码的膜糖蛋白，据研究发现这种分子在免疫应答、神经网络的形成和癌细胞形成方面扮演着重要的角色。CD24蛋白分子作为一个免疫共刺激分子和黏附分子，广泛参与肿瘤免疫和自身免疫性疾病的调控。研究发现，CD24与高迁移率族蛋白B1（high-mobility group box-1，HMGB1，生物通注：HMGB1是一种DNA结合蛋白，可作为细胞因子参与炎症反应），热休克蛋白70（heat shock rotein70，HSP70），热休克蛋白90（HSP90）具有功能上的联系。CD24是HMGB1、HSP70、HSP90蛋白的负调控因子，能降低这些蛋白的活性，还能抑制核因子-κB（NF-κB）的活性。BTLA是新近发现的抑制性共刺激分子，其在组织与淋巴细胞中均有表达，并通过与HVEM特异性结合形成HVEM-BTLA通路，该通路通过作用于Th1/Th2的平衡来产生免疫学效应。BTLA分子的酪氨酸经诱导磷酸化后，产生抑制信号，可以阻碍T细胞的活化[8]。大量的研究表明，BTLA在免疫应答中发挥的抑制功能在自身免疫性疾病的发生、发展中起着重要作用。
随着风湿病学的发展，发现SS中内脏损害并不少见[9-10]。研究显示，SS的呼吸系统受累是常见的，SS心脏病变发生率低，呈亚临床进展[11]。
本次实验研究表明，与正常组比较，SS组多普勒超声心功能变化检测结果异常率为63.33%，对照组异常率为10%；SS组肺功能变化检测结果异常率为79.68%，对照组异常率为20% 。本组超声显示左心房内径较正常组大（P < 0.05）。说明SS可以出现心肌病变。SS组左心室舒张功能与正常组比较，差异有统计学意义（P < 0.05）；A峰显著升高，E峰显著降低，与Gyongyosi M等[12]报道相同。肺功能参数中FEF25、FEF50、FEF75反映是小气道的状态，FEV1、MMF、PEF反映是通气功能，SS患者FEV1、FEF25、FEF50、MMF降低，说明肺功能降低特点是以通气功能降低为主，伴有一定程度的小气道障碍，这与杨宇路[13]的研究结果相似。与对照组比较，SS患者外周血BTLA占淋巴细胞比例明显降低（P < 0.01），说明阻碍T细胞的活化的功能下降；CD19+表达频率、CD24+表达频率、CD19++CD24+表达频率、CD19++BTLA占淋巴细胞比（%）、CD24++CD19+占淋巴细胞比（%）、CD24++BTLA占淋巴细胞比（%）显著升高（P < 0.05）。说明大量的B淋巴细胞增殖和活化，机体发生体液免疫。 SS腺外的心、肺病变是一个综合性的、复杂的过程，炎症反应一直伴随着始终。炎症本身可导致平衡失调，打破了自身免疫耐受，导致心肌抗原的免疫反应和小气道及周围支气管上皮的淋巴细胞浸润，进而对心肌细胞和肺组织损害，最终造成心肺功能的下降。SS患者体内长期反复发作的免疫炎症反应使得心肌受损，瓣膜受累，导致心脏瓣膜关闭不全，超声检查出现主动脉瓣关闭不全、左房室瓣关闭不全等。心肌的受损，出现左心室顺应性减退，等容舒张时间延长，舒张早期E峰下降，舒张晚期左房收缩加强以补偿左室充盈量，A峰增大，E/A < 1，超声心动图（UCG）表现为EF，%、舒张功能下降；同时室壁增厚，顺应性降低（即FS，%下降）。本实验结果还显示，随着患者心、肺功能的下降，BTLA占淋巴细胞的比值亦下降，CD19+表达频率、CD24+表达频率、CD19++CD24+表达频率、CD19++BTLA占淋巴细胞比（%）、CD24++CD19+占淋巴细胞比（%）、CD24++BTLA占淋巴细胞比（%）显著升高，且呈明显的相关性。说明BTLA下降、CD19++CD24+Brge的升高，可能进一步导致了抑制自身免疫的功能下降，打破了自身免疫耐受，发生了针对心肌抗原的免疫反应，对心肌细胞造成损害，从而出现心功能降低；而小气道及周围支气管上皮的淋巴细胞浸润又致使肺组织损害，最终导致肺功能的降低。
5 参考文献
[1] Kohriyama K，Katayama Y.Disproportion of helper T cell subsets in peripheral blood of patients with primary Sj?gren's syndrome[J].Antoimmnnity，2000，32（1）：67-72.
[2] Stockinger B，Bourgeois C，Kassiotis G.CD4+ memory T cells：functional differentiation and homeostasis[J].Immunol Rev，2006，211（1）：39-48.
[3] Wlladis EJ，KapilaR，Chu DS.Idiopathic CD4+ lymphocytopenia and Sj?gren's syndrome[J].Arch Ophthalmo1，2005，123（7）：1012.
[4] Sumida T.Molecular mechanismin Sj?gren's syndrome T cell receptors and autoantigens[J].Rvumachi，2002，42（ 5）：769-776.
[5] 董怡.2002年修订的干燥综合征国际分类（诊断）标准[J].中华风湿病学杂志，2002，6（4）：257.
[6] 陈勇，黄小燕.干燥综合征发病机制研究进展[J].现代预防医学，2011，38（20）：4328-4329.
[7] 王喜梅，李向培，厉小梅.B细胞的异常增殖在干燥综合征中的研究进展[J].安徽医药，2009，13（2）：117-120.
[8] Watanabe N，GavrieliM，Sedy JR，et al.BTLA is a lymphocyte inhibitory receptor with similarities to CTLA-4 and PD-1[J].Nat Immunol，2003，4（7）：670-679.
[9] 马骥良，袁秀琼，陈乐天，等.干燥综合征对肝脏外分泌功能的影响[J].中华内科杂志，1997，36（7）：474-475.
[10] 徐治波，毛伯勤，王晓霞，等.原发性干燥综合征的肺部改变[J].中华风湿病学杂志，2000，4（1）：42-43.
[11] 王秦，刘爱武，付自力，等.原发性干燥综合征心脏病变106例分析[J].临床医药实践杂志，2005，14（8）：573-574.
[12] Gyongyosi M，Pokorny G，Jambrik Z，et al.Cardiac manifestations in primary Sj?gren's syndrome[J].Annals of the Rheumatic Diseases，1996，55（51）：450-454.
[13] 杨宇路.原发性干燥综合征的肺功能分析[J].中华风湿病学杂志，2000，4（1）：42-43.
收稿日期：2013-09-11；修回日期：2013-12-30
【关键词】 干燥综合征；心功能；肺功能；CD19+CD24+Brge；BTLA
风湿病是侵害结缔组织和不同器官系统组织的一组疾病。心、肺两脏因富含血管、结缔组织常易被累及，导致心、肺功能下降，严重影响患者预后及生活质量。干燥综合征（sj?gren's syndrome，SS）是风湿病的一种，通过临床观察发现，SS患者在出现口干、眼干症状的同时，常伴有心慌、胸闷等表现，且随着干燥严重程度的增加而愈加明显。SS是一种慢性炎症性自身免疫性疾病，其确切病因和发病机制尚不明确，近年来研究[1-4]认为，T淋巴细胞的免疫失调及其介导的B淋巴细胞的免疫异常在其中发挥着关键作用，可能与细胞免疫特别是调节性B细胞的数量或功能异常有关。本文旨在通过观察干燥综合征患者心肺功能、外周血CD19+CD24+Brge及BTLA表达的变化及进行相关性分析，从而初步探讨SS心、肺功能变化的机制。
1 临床资料
1.1 一般资料 选取2012年1月至2013年4月在安徽中医药大学第一附属医院就诊的住院SS患者64例（定义为SS组），男1例，女63例；年龄31～73岁，平均（55.26±12.38）岁；病程最短6个月，最长17年，平均（6.21±4.43）年。另设对照组20例，男5例，女15例；年龄21～52岁，平均（28.5±10.4）岁；均来自安徽中医药大学第一附属医院体检中心，经体检和免疫学检查排除自身免疫性疾病，均为身体健康、无明显器质性疾病者。两组在年龄、性别等方面比较，差异无统计学意义（P > 0.05），具有可比性。
1.2 纳入标准 ①患者符合2002年制订的干燥综合征国际分类（诊断）标准[5]；②所有研究对象均通过本院伦理审查委员会审批，愿意并签署知情同意书。
1.3 排除标准 ①颈头面部放疗史，丙肝病毒感染，AIDS，淋巴瘤，结节病，GVH病，抗乙酰胆碱药的应用（如阿托品、莨菪碱、溴丙胺太林、颠茄等）；②合并有肝、肾和造血系统等严重原发性疾病者；③发病前有精神障碍家庭史和发病后有意识障碍的患者；④妊娠及哺乳期妇女。
1.4 试剂和仪器 单克隆抗体组合PE-BTLA、PE-CYTM5-CD19，FITC-CD24、红细胞裂解液、Cal-iBRITE beads三色荧光微球，美国BectonDickison公司产品。FACSCalibu流式细胞仪，美国Beckon Dickinson公司产品；Avdia-120型血细胞分析仪，美国Bayer公司产品；HERMLE-Z383K型离心机，德国 HERMLE公司产品。
2 方 法
2.1 心功能测定 运用美国GE VIVID 7超声诊断仪，探头频率为2～5 MHz。患者取左侧卧位，平静呼吸，分别在胸骨旁和心尖切面部获取常规切面，观察左室腔的大小、心内膜的回声以及有无增厚，测量左室后壁（LVPW）的厚度。同时测量左心房舒张末期内径（LADd）、左心室舒张末期内径（LVDd），左心室射血分数（LVEF）和左心室内径缩短率（FS，%）。检测舒张期左房室瓣血流频谱获得左室舒张早期血流峰值流速（E峰）、左心室舒张晚期血流峰值流速（A峰）、舒张早期血流峰值速度/舒张晚期血流峰值速度（E/A）。所有指标均连续测量3次，取平均值，超声检查的操作及分析均由高年资的专业超声医师完成。
2.2 肺功能测定 采用德国Jager MasterScreen自动肺功能检测仪，检测项目有深吸气量（IC）、最大通气量（MVV）、用力肺活量（FVC）、第1秒用力呼气容积（FEV1）、用力呼吸1秒率（FEV1/FEV）、25%肺活量位的最大呼气流量（FEF25）、50%肺活量位的最大呼气流量（FEF50）、75%肺活量位的最大呼气流量（FEF75）和最大呼气流量（PEF）。为了消除性别、年龄、身高、体质量等因素对肺功能测定值的影响，以上参数均以实测值/正常预计值（%）表示，各参数皆以实测值/正常预计值< 80%为异常。 2.3 样本采集 分别取两组治疗前后的外周静脉血2 mL，抗凝，分别取100 μL血液（白细胞约为1×106个·100 μL-1）加入空白干燥试管中，按采集顺序编号。
2.4 检测方法 在干燥试管加入PE-BTLA ，FITC-CD24 20 μL和PE-CYTM5-CD19 20 μL。在4 ℃条件下避光放置30 min。染色后在室温下分别加入去离子水1∶10稀释的红细胞裂解液2 mL，避光15 min。裂解后将试管分别于1 500 r·min-1离心机离心3 min，弃去上清液，即得白细胞沉淀。将白细胞沉淀使用生理盐水洗涤2次，分别于1 500 r·min-1离心机离心3 min，循环离心2次，最后澄清的沉淀分别加入质量分数4%多聚甲醛600 μL制成单细胞悬液，运用FACSComp软件进行上机分析。
2.5 统计学方法 采用SPSS 17.0软件进行统计分析。计量资料以表示，两组间的比较采用独立样本t检验，各指标之间关系采用Pearson相关性分析。以P < 0.05为差异有统计学意义。
3 结 果
3.1 两组心、肺功能异常率比较 见表1。
3.2 两组心功能比较 与对照组比较，SS组心功能参数E峰、FS，%、E/A比值均显著降低（P < 0.01），A峰、LADd显著升高（P < 0.01）。见表2。
3.3 两组肺功能比较 与对照组比较，SS组患者肺功能指标IC、MVV、FEF25、FEF50、FEF75、PEF均明显降低（P < 0.05或P < 0.01）。见表3。
3.4 两组外周血CD19+CD24+Brge及BTLA比较 与对照组比较，SS组患者外周血BTLA占淋巴细胞比例明显降低（P < 0.01），CD19+表达频率、CD24+表达频率、CD19++CD24+表达频率、CD19++BTLA占淋巴细胞比（%）、CD24++CD19+占淋巴细胞比（%）、CD24++BTLA占淋巴细胞比（%）显著升高（P < 0.05）。见表4。
3.5 SS组心、肺功能与CD19+CD24+Brge及BTLA的相关性分析 Spearman相关分析结果显示，SS组患者心、肺功能与BTLA占淋巴细胞比（%）呈明显的负相关（P < 0.05）。心功能参数FS峰与CD19+表达频率、CD19++BTLA占淋巴细胞比（%）呈显著正相关（P < 0.05）。E峰、LADd、PEF与CD19+表达频率、CD24+表达频率、CD19++BTLA占淋巴细胞比（%）、CD24++CD19+占淋巴细胞比（%）、CD24++BTLA占淋巴细胞比（%），均呈显著负相关（P < 0.05）。肺功能参数FEV1、FEF50与CD19+表达频率、CD24+表达频率、CD19++BTLA占淋巴细胞比（%）、CD24++CD19+占淋巴细胞比（%），呈显著正相关（P < 0.05）。FEF75与CD19+表达频率、CD24+表达频率，呈显著正相关（P < 0.05）；与CD19++BTLA占淋巴细胞比（%）、CD24++CD19+占淋巴细胞比（%）、CD24++BTLA占淋巴细胞比（%），呈显著负相关（P < 0.05）。见表5。
4 讨 论
SS可引起患者腺体上皮细胞活化和细胞凋亡诱导T、B细胞活化和局部浸润，产生多种炎性介质和细胞因子，从而引起腺体破坏。在SS患者中，T淋巴细胞相对减少，而B淋巴细胞数量增多。B细胞的表现：被激活的腺上皮细胞微环境对浆细胞的分化和局部IgA的合成起到了作用。在SS患者的唾液腺中发现大量IgA型抗SS抗体，提示局部的免疫球蛋白合成增强[6]。B细胞在抗原刺激下可分化为浆细胞，合成和分泌免疫球蛋白，主要执行机体的体液免疫。CD19+是一种属于Ig超家族成员、分子量为95 000的穿膜糖蛋白，分布于B细胞表面。近年来，B淋巴细胞在SS中的作用越来越被重视，如B细胞克隆性增殖、B淋巴细胞刺激因子诱导B细胞增殖和活化及以B细胞为靶向治疗SS等。这些研究让人们对SS的发病机制和治疗有了更深的认识[7]。CD24是染色体6q21基因编码的膜糖蛋白，据研究发现这种分子在免疫应答、神经网络的形成和癌细胞形成方面扮演着重要的角色。CD24蛋白分子作为一个免疫共刺激分子和黏附分子，广泛参与肿瘤免疫和自身免疫性疾病的调控。研究发现，CD24与高迁移率族蛋白B1（high-mobility group box-1，HMGB1，生物通注：HMGB1是一种DNA结合蛋白，可作为细胞因子参与炎症反应），热休克蛋白70（heat shock rotein70，HSP70），热休克蛋白90（HSP90）具有功能上的联系。CD24是HMGB1、HSP70、HSP90蛋白的负调控因子，能降低这些蛋白的活性，还能抑制核因子-κB（NF-κB）的活性。BTLA是新近发现的抑制性共刺激分子，其在组织与淋巴细胞中均有表达，并通过与HVEM特异性结合形成HVEM-BTLA通路，该通路通过作用于Th1/Th2的平衡来产生免疫学效应。BTLA分子的酪氨酸经诱导磷酸化后，产生抑制信号，可以阻碍T细胞的活化[8]。大量的研究表明，BTLA在免疫应答中发挥的抑制功能在自身免疫性疾病的发生、发展中起着重要作用。
随着风湿病学的发展，发现SS中内脏损害并不少见[9-10]。研究显示，SS的呼吸系统受累是常见的，SS心脏病变发生率低，呈亚临床进展[11]。
本次实验研究表明，与正常组比较，SS组多普勒超声心功能变化检测结果异常率为63.33%，对照组异常率为10%；SS组肺功能变化检测结果异常率为79.68%，对照组异常率为20% 。本组超声显示左心房内径较正常组大（P < 0.05）。说明SS可以出现心肌病变。SS组左心室舒张功能与正常组比较，差异有统计学意义（P < 0.05）；A峰显著升高，E峰显著降低，与Gyongyosi M等[12]报道相同。肺功能参数中FEF25、FEF50、FEF75反映是小气道的状态，FEV1、MMF、PEF反映是通气功能，SS患者FEV1、FEF25、FEF50、MMF降低，说明肺功能降低特点是以通气功能降低为主，伴有一定程度的小气道障碍，这与杨宇路[13]的研究结果相似。与对照组比较，SS患者外周血BTLA占淋巴细胞比例明显降低（P < 0.01），说明阻碍T细胞的活化的功能下降；CD19+表达频率、CD24+表达频率、CD19++CD24+表达频率、CD19++BTLA占淋巴细胞比（%）、CD24++CD19+占淋巴细胞比（%）、CD24++BTLA占淋巴细胞比（%）显著升高（P < 0.05）。说明大量的B淋巴细胞增殖和活化，机体发生体液免疫。 SS腺外的心、肺病变是一个综合性的、复杂的过程，炎症反应一直伴随着始终。炎症本身可导致平衡失调，打破了自身免疫耐受，导致心肌抗原的免疫反应和小气道及周围支气管上皮的淋巴细胞浸润，进而对心肌细胞和肺组织损害，最终造成心肺功能的下降。SS患者体内长期反复发作的免疫炎症反应使得心肌受损，瓣膜受累，导致心脏瓣膜关闭不全，超声检查出现主动脉瓣关闭不全、左房室瓣关闭不全等。心肌的受损，出现左心室顺应性减退，等容舒张时间延长，舒张早期E峰下降，舒张晚期左房收缩加强以补偿左室充盈量，A峰增大，E/A < 1，超声心动图（UCG）表现为EF，%、舒张功能下降；同时室壁增厚，顺应性降低（即FS，%下降）。本实验结果还显示，随着患者心、肺功能的下降，BTLA占淋巴细胞的比值亦下降，CD19+表达频率、CD24+表达频率、CD19++CD24+表达频率、CD19++BTLA占淋巴细胞比（%）、CD24++CD19+占淋巴细胞比（%）、CD24++BTLA占淋巴细胞比（%）显著升高，且呈明显的相关性。说明BTLA下降、CD19++CD24+Brge的升高，可能进一步导致了抑制自身免疫的功能下降，打破了自身免疫耐受，发生了针对心肌抗原的免疫反应，对心肌细胞造成损害，从而出现心功能降低；而小气道及周围支气管上皮的淋巴细胞浸润又致使肺组织损害，最终导致肺功能的降低。
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收稿日期：2013-09-11；修回日期：2013-12-30