【摘 要】
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目的 探讨小鼠胚胎干细胞(mouse embryonic stem cells,mESCs)向原始生殖细胞(primordial germ cells,PGCs)分化过程中特异基因表达变化及可能机制.方法 mESCs分化形成拟胚体
【机 构】
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男性生殖和遗传广东省重点实验室,深圳北京大学香港科技大学医学中心
【基金项目】
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深圳市科技研发资金基础研究计划资助项目;广东省医学科学研究基金;深圳市科技计划重点项目;高等学校博士学科点专项科研基金
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目的 探讨小鼠胚胎干细胞(mouse embryonic stem cells,mESCs)向原始生殖细胞(primordial germ cells,PGCs)分化过程中特异基因表达变化及可能机制.方法 mESCs分化形成拟胚体(embryoid bodies,EBs),不同浓度atRA(1μM,2 μ M,5 μ M)持续诱导EBs 16h、2d和5d,RT-PCR、和免疫荧光分别检测Lin28和Blimp1以及相应蛋白的表达变化.结果 atRA诱导16h的EBs其Lin28 mRNA表达量较高,随着诱导时间延长而逐渐降低,Blimp1则无明显变化.WB结果显示EBs的Lin28蛋白表达随诱导时间延长逐渐减弱,而Blimp1蛋白表达逐渐增强.免疫荧光显示Lin28和Blimp1阳性信号均定位于细胞胞浆,其变化特点与WB结果相一致.结论 EBs经atRA诱导后可影响Lin28的表达,Lin28和Blimp1的变化并不协调,其蛋白表达随着诱导会随之发生变化.atRA诱导可能使PGCs分化的Lin28低水平表达时期提前出现.
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