探究甲状腺激素对蝌蚪发育的影响

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  蝌蚪是青蛙的幼体,在水中生活,生长到一定程度开始变态。变态期内,蝌蚪内外器官由适应水栖生活转变为适应陆栖生活,外观上出现成对的附肢,尾部逐渐萎缩,最后趋于消失。正常情况下,从孵化出蝌蚪到形成成体幼蛙,大约需要3个月左右的时间。如在学习“激素的调节”后,学生了解到甲状腺激素有促进动物个体生长发育的作用。为探索甲状腺激素对动物生长发育的影响,我组织学生进行甲状腺激素对蝌蚪变态发育影响的课外探究实验,并观察在不同浓度的甲状腺激素作用下蝌蚪的发育情况。
  一、实验材料与准备用具
  同时孵化体长约15mm的同种蝌蚪,新鲜水草(如金鱼藻等),4个玻璃缸(高11cm、直径20cm) 或2000mL玻璃烧杯,捞鱼网,坐标纸(1mm×1mm),培养皿,甲状腺激素片,甲状腺抑制剂(甲硫咪唑)。
  二、实验方法与步骤
  1.实验动物
  5月上旬从西安市长安区常宁宫旁小溪中采集蝌蚪,放在实验室的玻璃缸中饲养,3天后选取40只大小相等、活跃度良好的蝌蚪作为实验材料备用。
  2.实验方法
  实验中遵循等量、对照和单因子控制的原则,运用对照实验方法,建立实验组和对照组。有空白对照(不饲喂任何药剂)、条件对照(饲喂甲状腺抑制剂,即甲硫咪唑片)和相互对照(实验组中饲不同浓度甲状腺激素片的相互对照)三种实验方法,通过比较和对照,探索甲状腺激素对蝌蚪变态发育的影响。
  3.实验步骤
  (1)将4个玻璃缸分别编为1号、2号、3号、4号。
  (2)在4个玻璃缸中分别放入2000mL提前晾晒3~4天的自来水和等量的新鲜水草,然后从备用的40只蝌蚪中随机取出10只放入每个玻璃缸中。
  (3)分组处理(见表1)。
  (4)向2号、3号、4号玻璃缸连续投药7天,每隔1天观察一次。观察时先用小网将蝌蚪捞出来放在培养皿中,再将培养皿放在坐标纸上,观察与测量蝌蚪的体长、尾、前肢和后肢的生长情况及变化等,并记录蝌蚪的存活情况,连续观察20~30天。
  三、实验结果与分析
  1. 蝌蚪体长的变化
  由如下图1可知,投喂不同药物及不同浓度甲状腺激素后,各组蝌蚪体长相差较大,其中4号组(饲喂甲状腺抑制剂组)蝌蚪体长增长最快,高于1号组(空白对照组),说明在蝌蚪发育的某时间段加入甲状腺抑制剂(甲硫咪唑),可加快蝌蚪体长的增长速度。2号组、3号组(投喂甲状腺激素)蝌蚪体长增长速度明显低于1号组,说明在蝌蚪生长发育的某时期加入甲状腺激素,抑制了蝌蚪体长的增长速度。 其中3号组(投喂较高浓度的甲状腺激素)蝌蚪的体长在实验8d后出现负增长,表明此时蝌蚪已开始出现褪尾现象。
  2.蝌蚪活动能力及死亡情况
  实验结果显示,投药后前3天1号组和4号组蝌蚪活动能力正常,2号组、3号组蝌蚪活跃度显著提高,说明甲状腺激素提高了其神经系统的兴奋性。但4天后,2号组、3号组蝌蚪的活跃度明显下降,并且头部形态发生变化,表明开始进行变态。由如下表2也可知,实验进行8天后,3号组中蝌蚪出现死亡现象,19天后蝌蚪大量死亡,但发育速度快,死亡蝌蚪有后肢出现,表明投喂较高浓度的甲状腺激素对蝌蚪有致死作用。4号组直到实验结束也无蝌蚪死亡。
  3. 蝌蚪前后肢生长情况
  实验结果(如表3)表明,2号组、3号组在实验第4天时已分别有2只、3只蝌蚪出现后肢,实验第8天时3号组存活的7只蝌蚪已全部长出后肢,而1号组、4号组的蝌蚪仍未出现后肢,表明甲状腺激素有促进蝌蚪发育的作用。第14天时1号组有2只蝌蚪出现后肢,第19天时4号组有3只蝌蚪出现后肢,较1号组晚了5天,表明抑制了甲状腺激素的作用后,蝌蚪的发育变慢。随着后肢的出现,蝌蚪的头部后端变窄变尖,前端变宽,两只眼变得明显而突出。3号组在实验第11天时,有1只蝌蚪尾根部变弯,1只左眼出现凹陷。
  四、 讨论
  一些研究表明,投喂甲状腺激素可促进蝌蚪体长的增长速度,并加快蝌蚪的变态发育。而本实验自投喂药物后,根据实验数据仅发现甲状腺激素促进蝌蚪的变态发育过程,并没有发现甲状腺激素对蝌蚪的体长增加有促进作用。可能是本实验使用的蝌蚪在进行实验时已生长发育到某一阶段,该阶段甲状腺激素对促进蝌蚪体长增长的作用已不明显。
  实验结果还发现,投喂甲状腺抑制剂后,蝌蚪体长的增长速度较空白对照组快,但发育缓慢。从实验开始直至实验结束,该组蝌蚪无死亡现象,可能是甲状腺抑制剂阻碍了蝌蚪的变态发育,因变态过程中经历了组织和器官的重构,其中包括神经系统的重塑、四肢的生长和尾部的退化,蝌蚪需要耗费体能去完成变态过程,导致体长的增长到抑制。若变态过程受到抑制,蝌蚪体长的增长不会表现出比正常蝌蚪增长快的现象, 此时蝌蚪的抵抗力可能会较正常蝌蚪大。
  (责任编辑 杜 华)
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