【摘 要】
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[目的]探讨lncRNA-PVT1通过Hp/CagA介导的胃黏膜屏障损伤促进胃癌的发病机制。[方法]检测lncRNA-PVT1在CagA阳性幽门螺杆菌菌株（Hp-CagA+）和CagA基因敲除突变体（Hp-ΔCagA-）感染的人胃癌上皮细胞系AGS中的表达。过表达PVT1，分为对照组和PVT1组。qPCR和荧光原位杂交技术测定lncRNA-PVT1的表达，CCK8和流式细胞术检测细胞活力及凋亡率。
【基金项目】
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重庆市技术创新与应用发展专项面上项目（cstc2019iscx-msxmX0202）；
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[目的]探讨lncRNA-PVT1通过Hp/CagA介导的胃黏膜屏障损伤促进胃癌的发病机制。[方法]检测lncRNA-PVT1在CagA阳性幽门螺杆菌菌株（Hp-CagA+）和CagA基因敲除突变体（Hp-ΔCagA-）感染的人胃癌上皮细胞系AGS中的表达。过表达PVT1，分为对照组和PVT1组。qPCR和荧光原位杂交技术测定lncRNA-PVT1的表达，CCK8和流式细胞术检测细胞活力及凋亡率。检测细胞中活性氧（ROS）水平，透射电子显微镜（TEM）观察细胞中线粒体的超微结构；Western blot检测两组中细胞周期蛋白CDK4和cyclinD1，凋亡蛋白BAX、Bcl-2和裂解的caspase3，线粒体裂变相关蛋白DRP1和MFN2，紧密连接蛋白（occludin,claudin-1和ZO-1）的表达。[结果 ] lncRNA-PVT1在Hp-CagA+感染AGS细胞中表达增加。过表达PVT1后增加Hp-CagA+感染AGS细胞中增殖，降低了其凋亡，调节HpCagA+感染AGS细胞中CDK4（1.22±0.02 vs 1.65±0.03）和cyclinD1（1.16±0.05 vs 1.53±0.01）的表达，增加了ROS生成的增加和线粒体膜电位（MMP）而升高了细胞的比例，增加了线粒体脊的肿胀畸形，降低了DRP1的磷酸化和MFN2（1.16±0.06 vs 0.59±0.03）和BAX（1.05±0.06 vs 1.40±0.03）的表达，升高了Bcl-2（1.66±0.03 vs 1.24±0.02）和裂解的caspase3（1.03±0.06 vs 1.71±0.02）的表达，增加了氧化应激反应诱导的线粒体功能障碍。过表达PVT1通过降低紧密连接蛋白occludin（4.13±0.05 vs 1.31±0.02）、claudin-1 （5.03±0.06 vs 1.33±0.03）和ZO-1 （1.48±0.04 vs 0.60±0.01）表达增加了细胞屏障。[结论]lncRNA-PVT1通过Hp/CagA介导的胃黏膜屏障损伤促进胃癌的发病，促进肿瘤形成和发展。
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