【摘 要】
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目的:为获得非融合高表达hbFGF的大肠杆菌表达系统;方法:设计PCR引物,将hbFGF的5'端前10个密码子突变,优选大肠杆菌较偏好的密码子并降低G+C含量,通过双酶切法将突变后的
【基金项目】
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国家科技攻关项目，国家高技术研究发展计划(863计划)，广东省广州市科技局科技攻关项目
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目的:为获得非融合高表达hbFGF的大肠杆菌表达系统;方法:设计PCR引物,将hbFGF的5'端前10个密码子突变,优选大肠杆菌较偏好的密码子并降低G+C含量,通过双酶切法将突变后的hbFGF克隆入pBV220质粒载体中,筛选出重组子,再通过温控法对重组菌体进行诱导,分析表达情况,并进一步纯化和测活;结果:bFGF在该系统中高水平表达,表达量超过30%,其中绝大部分形成包涵体,经过包涵体变复性等纯化步骤后测活性,证明有生物活性;结论:TIR区域的基因突变对hbFGF在pBV220中高效表达起到关键
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