目的 利用稳定表达凋亡相关斑点样蛋白（ASC）的小鼠巨噬细胞系（RAW-ASC）构建巨噬细胞焦亡体外模型，深入探讨不同粒径二氧化硅（SiO2）粉尘诱导核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3（NLRP3）炎性小体依赖的巨噬细胞焦亡机制及其在矽肺发病中的潜在作用。方法 以脂多糖（LPS,1μg/ml）预处理RAW-ASC巨噬细胞6 h,纳米（100μg/ml）或微米（750μg/ml）SiO2粉尘暴露4 h,构建巨噬细胞焦亡体外模型，同时匹配空白对照组、LPS预处理组和焦亡阳性对照组（1μg/ml LPS预处理6 h后，3 mmol/L ATP处理4 h）,检测各组细胞活性、增殖能力、破裂状况和焦亡相关蛋白表达情况。针对离子通道和焦亡通路相关靶点，分别加入NLRP3抑制剂和嘌呤能P2X7受体（P2X7）拮抗剂，评估SiO2诱发焦亡改变。结果 与对照组相比，纳米和微米SiO2粉尘均可减弱巨噬细胞活力并抑制细胞增殖，还可促进细胞裂解，使细胞外乳酸脱氢酶（LDH）（纳米组：t=78.906,P<0.001;微米组：t=8.123,P<0.001）、细胞内活性氧（ROS）（纳米组：t=5.662,P<0.001;微米组：t=11.761,P<0.001）和钙离子(Ca2+)（纳米组：t=13.224,P<0.001;微米组：t=40.733,P<0.001）水平升高，加速ATP耗竭（纳米组：t=4.898,P<0.001;微米组：t=6.029,P<0.001）,上调焦亡相关蛋白NLRP3、ASC、半胱天冬氨酸蛋白酶-1（Caspase-1）、Gasdermin D（GSDMD）和白介素-1β（IL-1β）表达（纳米SiO2组：t=5.476,P=0.008;t=5.846,P=0.017;t=8.078,P=0.006;t=8.420,P=0.004;t=5.361,P=0.003;微米SiO2组：t=4.411,P=0.013;t=6.154,P=0.015;t=7.188,P=0.002;t=14.265,P<0.001;t=8.574,P<0.001）。加入NLRP3抑制剂或P2X7拮抗剂后，NLRP3蛋白表达水平下调（纳米组：t=3.894,P=0.007;t=13.954,P<0.001;微米组：t=2.470,P=0.034;t=13.263,P<0.001）。结论 纳米和微米级SiO2粉尘暴露均可抑制巨噬细胞活性和增殖能力，扰乱P2X7离子通道对ATP的传递能力，诱发NLRP3依赖巨噬细胞焦亡，相关过程可能是矽肺发病的重要环节。