毛细管电泳与微流控芯片电泳快速检测粪便中腺病毒的方法建立

来源 :四川大学学报(医学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户:theone2005
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的建立粪便中腺病毒的PCR-毛细管电泳-激光诱导荧光和PCR-微流控芯片电泳-激光诱导荧光快速检测方法。方法采用试剂盒法提取粪便中腺病毒DNA,选择腺病毒六邻体基因保守区域进行PCR扩增反应。PCR产物分别用高灵敏度的SYBR Gold和SYBR Orange核酸荧光染料进行标记,在优化的毛细管电泳和微流控芯片电泳条件下分离,采用激光诱导荧光检测特异性PCR扩增产物。结果腺病毒扩增产物在优化的毛细管电泳和微流控芯片电泳条件下可分别于9min和6min内完成检测。将PCR扩增产物测序,并与NCBI基因库中核酸序列比对,结果表明所选用的扩增序列特异性良好。商品化DNA Marker毛细管电泳和微流控芯片电泳对目标DNA片段bp值求得的日内精密度分别为1.14%~1.34%和1.18%~1.48%,日间精密度分别为1.27%~2.76%和2.85%~4.06%。毛细管电泳-激光诱导荧光法和微流控芯片电泳-激光诱导荧光法检测腺病毒的灵敏度分别为2.33×102 copies/mL和2.33×103 copies/mL。两种方法用于实际粪便样品测定,准确度高。结论本研究建立的PCR-毛细管电泳-激光诱导荧光和PCR-微流控芯片电泳-激光诱导荧光检测方法能够快速、灵敏、准确地检测出粪便中的腺病毒。
其他文献
目的:探讨浆细胞性乳腺炎的病理学及X线特征。方法:对10例经病理证实的浆细胞性乳腺炎病人的X线片进行回顾性分析。结果:浆细胞性乳腺炎的病理特点为导管扩张、小灶性脂肪坏
目的评估双频谱多普勒同步测量二尖瓣前向血流E峰和二尖瓣环组织多普勒e’峰的起始时间差(T E-e’)在无创估测左室舒张末压(LVEDP)和左室舒张功能不全中的价值。方法纳入NYHA
国际化经营战略是企业国际化经营的核心。"企业国际化经营战略的六层级分析模型"对于帮助企业增强对国际化经营的认识,提高国际化经营分析能力,制定符合外部发展趋势又能结合
离子液体作为一种环境友好的溶剂具有蒸气压低、毒性低和“结构可设计”等突出优点,不仅在电化学、有机合成,也在分离分析化学领域得到广泛的重视。应用离子液体取代传统的有
<正>近年来,随着环境和石油危机的加剧,从海洋生物质中提取工业用原材料引起了研究者的广泛关注。在大量的海洋生物质提取物中,纳米微晶纤维素(CNs)因其具有大的比表面积、可
会议
目的通过对结节性硬化症(Tuberous sclerosis complex,TSC)继发癫痫患者临床特点分析,提高临床医生对该病的认识和诊治水平,改善患者预后。方法 2012年5月-2015年5月收集54例
<正> 中国出版科学研究近期作了一份我国国民读书状况的调查,据调查结果推算,全国有藏书的家庭占六成左右,50万以上人口的城市非农户中有藏书的家庭占八成以上(83.1%),而广大
随着我国核电事业的发展,核电厂用的进口电极锅炉也随之进入我国,而浸没式电极锅炉首次应用于我国核电厂,本文主要介绍浸没式电极锅炉的原理及其在核电厂中的应用,以供同行参
对猪场常用药物的配伍禁忌及避免措施进行了介绍。
酚类化合物普遍存在于众多化工产品生产过程排放的废水中,具有毒性强、难以降解、处理成本高的特点。研究表明,生物酶催化能高效降解酚类污染物且对环境无害,但是游离酶稳定