携人胰岛素基因的“可控”型腺病毒载体的构建与初步验证

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目的:设计并构建一种“可控”型腺病毒载体,该腺病毒载体在加入诱导剂后能自行消亡,从而解决其激发宿主免疫及产生复制型腺病毒等问题,为临床提供一种更安全的外源基因载体。方法:以传统Ad EasyTM腺病毒载体系统为基础,将Cre-Lox P定点敲除系统的Cre酶基因安置在Tet-On诱导表达系统的下游,而在穿梭质粒右臂基因组上下游分别插入一个Lox P位点,构建成“可控”型腺病毒穿梭质粒,并插入全长人胰岛素基因,感染大鼠骨髓间充质干细胞,观察诱导剂加入前后细胞荧光蛋白表达及人胰岛素分泌情况。结果:成功构建携全
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