探讨粒细胞集落刺激因子(G-CSF)对缺氧缺血性脑损伤(HIBD)新生大鼠的神经保护作用及其对内质网应激的影响。
方法54只7日龄新生SD大鼠采用随机数字表法分为3组：假手术组(Sham组)、缺氧缺血模型组(HIBD组)及给药组(G-CSF组)，每组18只，采用改良Rice法建立HIBD模型，G-CSF组造模后1 h腹腔注射50 μg/kg G-CSF，Sham组及HIBD组注射相应剂量9 g/L盐水。各组分别于造模后24 h采用2，3，5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法检测脑梗死大小，苏木精-伊红(HE)染色观察大脑病理变化，脱氧核糖核苷酸未端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)观察大脑皮质及海马CA1区神经细胞凋亡情况，采用免疫荧光检测各组大鼠大脑皮质葡萄糖调节蛋白78(GRP78)表达情况，采用Western blot检测GRP78、CCAAT/增强子结合蛋白(CHOP)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶12(Caspase-12)内质网应激相关蛋白表达情况。
结果造模后24 h，HE染色示Sham组未见明显神经元损伤表现，HIBD组可见脑组织结构改变明显，G-CSF组病理改变较HIBD组减轻。HIBD组梗死面积[(25.40±5.15)%]显著高于Sham组[(0.31±0.15)%]及G-CSF组[(16.36±4.97)%]，差异均有统计学意义(均P<0.05)。HIBD组免疫荧光GRP78阳性表达[(49.38±10.06)%]显著高于Sham组[(9.12±4.50)%]及G-CSF组[(30.61±6.35)%]，差异均有统计学意义(均P<0.05)。HIBD组海马CA1区及皮质凋亡细胞比例[(44.84±11.54)%、(48.23±14.07)%]均明显高于G-CSF组[(17.87±7.20)%、(26.18±9.96)%]，均显著低于HIBD组，差异均有统计学意义(均P<0.05)。HIBD组GRP78、CHOP、Caspase-12相对表达水平(0.63±0.24、0.72±0.21、0.68±0.25)均显著高于Sham组(0.20±0.08、0.28±0.08、0.23±0.07)及G-CSF组(0.39±0.13、0.51±0.18、0.48±0.16)，差异均有统计学意义(均P<0.05)。
结论腹腔注射G-CSF对HIBD新生大鼠有神经保护作用，可能通过抑制内质网应激减少神经细胞凋亡。