香蕉果肉类胡萝卜素提取与测定方法

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大规模开展香蕉类胡萝卜素种质资源评价,发掘高类胡萝卜素的品种资源,提高主栽品种中类胡萝卜素的含量,对于提升香蕉产业竞争力具有重要的作用。开展此项研究需要建立高效的香蕉果肉类胡萝卜素提取和测定体系。本文拟建立基于超高效液相色谱仪(Agilent 1290),适用于香蕉果肉的类胡萝卜素提取及测定的方法。利用YMC-C30色谱柱,在450 nm检测波长和柱温20℃条件下,比较了不同的料液比(g∶mL,1∶6、1∶9、1∶12、1∶15)、定容溶液的比例(V∶V,MTBE∶甲醇=1∶0、1∶1、1∶2)、流动相(V∶V,甲醇∶乙腈=4∶0、3∶1、2∶2、1∶3、0∶4)、流速(0.6、0.8、1.2 mL/min)等对类胡萝卜素组分鉴定和含量测定的影响。结果表明,当提取试剂正己烷∶丙酮∶无水乙醇=2∶1∶1(V∶V∶V),果肉与提取试剂的料液比为1∶9,超声波破碎30 min,重复3次,定容溶液MTBE∶甲醇=1∶1时,香蕉类胡萝卜素组分分离的效果最好。当色谱条件A相以甲醇∶乙腈,B相以MTBE(100%)为流动相,进样量为10μL,流速为1mL/min进行梯度洗脱时,可以很好的鉴定并分离类胡萝卜素的主要组分。利用优化后的体系进行检测不同类胡萝卜素含量的香蕉品种,发现香蕉果肉中的主要类胡萝卜素组分为叶黄素、α-胡萝卜素、β-胡萝卜素。高类胡萝卜素含量的‘Frenchsomber’香蕉品种约含9.79μg/g,而低含量的‘中蕉8号’香蕉品种只有约0.201μg/g,这也表明不同香蕉品种中类胡萝卜素的含量差异相对较大。本文中以香蕉果肉为材料所建立的类胡萝卜素提取与检测方法,操作简单,精确度高,为科研工作者在香蕉类胡萝卜素的功能研究方面提供参考。
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