孤儿核受体NR4A1表达对氧-葡萄糖剥夺诱导培养大鼠小脑颗粒神经元凋亡的影响

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目的探讨孤儿核受体NR4A1表达对氧一葡萄糖剥夺(oxygen.glucose deprivation,OGD)诱导培养大鼠小脑颗粒神经元凋亡的影响及其可能机制。方法大鼠小脑颗粒细胞原代培养7~8d后给予OGD处理。应用四甲基偶氮唑蓝法检测细胞活性,流式细胞术检测细胞凋亡率,蛋白质印迹法检测NR4A1、胱天蛋白酶-3和细胞色素c蛋白表达,实时定量聚合酶链反应检测NR4A1 mRNA表达。用编码NR4A1的慢病毒载体转染大鼠小脑颗粒神经元,并检测转染大鼠小脑颗粒神经元OGD后凋亡率以及细胞色素c和胱天蛋白酶-3表达。结果随着OGD时间的延长,培养大鼠小脑颗粒神经元活性显著性降低,凋亡率显著性增高,NR4A1mRNA和蛋白以及胱天蛋白酶-3和细胞色素c蛋白表达均显著性上调。转染NR4A1的大鼠小脑颗粒神经元过表达NR4A1,OGD后凋亡率显著性降低,胱天蛋白酶-3和细胞色素C蛋白表达显著性下调。结论NR4A1过表达能通过下调胱天蛋白酶-3和细胞色素c表达减少OGD诱导的大鼠小脑颗粒神经元凋亡。

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