【摘 要】
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目的:从大鼠磨牙胚组织中克隆大鼠磨牙牙根发育相关基因mrp1,构建原核融合表达载体,利用大肠杆菌表达其C端肽.方法:从生后3 d SD大鼠仔鼠磨牙胚中提取总mRNA,通过RT-PCR扩增
【机 构】
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第四军医大学口腔医学院,第四军医大学组织工程实验中心,第四军医大学口腔医学院
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目的:从大鼠磨牙胚组织中克隆大鼠磨牙牙根发育相关基因mrp1,构建原核融合表达载体,利用大肠杆菌表达其C端肽.方法:从生后3 d SD大鼠仔鼠磨牙胚中提取总mRNA,通过RT-PCR扩增出mrp1C端肽段基因并克隆进中间载体,然后将插入基因克隆入GST融合表达载体pGEX-4T-1,以大肠杆菌DH5α为宿主菌,在28℃下进行IPTG诱导.结果:克隆载体序列酶切鉴定、序列测定完全正确;含重组质粒的工程菌经诱导后在SDS-PAGE上出现一条新生蛋白带,Mr为36×103,与预期C端肽Mr大小一致,约
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