【摘 要】
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目的评价基孔肯雅病毒(CHIKV)病毒样颗粒(VLPs)免疫原性。方法通过构建CHIKV结构蛋白编码基因C-E3-E2-6K-E1昆虫细胞表达载体,然后与杆状病毒线性DNA共转染SF9昆虫细胞制备重组杆状病毒,感染悬浮培养的SF9细胞制备VLPs。IFA、SDS-PAGE和Western-Blot法对表达产物进行鉴定分析,用纯化VLPs免疫BALB/c小鼠,评价免疫原性。结果CHIKV结构蛋白装配
【机 构】
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102206 北京,中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所,102206 北京,中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所,102206 北京,中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所,102206 北京,中国疾
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目的评价基孔肯雅病毒(CHIKV)病毒样颗粒(VLPs)免疫原性。
方法通过构建CHIKV结构蛋白编码基因C-E3-E2-6K-E1昆虫细胞表达载体,然后与杆状病毒线性DNA共转染SF9昆虫细胞制备重组杆状病毒,感染悬浮培养的SF9细胞制备VLPs。IFA、SDS-PAGE和Western-Blot法对表达产物进行鉴定分析,用纯化VLPs免疫BALB/c小鼠,评价免疫原性。
结果CHIKV结构蛋白装配形成病毒样球形颗粒,免疫小鼠可诱导CHIKV特异性抗体,能够有效中和CHIKV感染Vero细胞。
结论CHIKV VLPs能够通过杆状病毒系统在昆虫细胞中有效分泌表达,并具有较强免疫原性,为基于CHIKV VLPs的免疫学检测试剂乃至疫苗的研制奠定了基础。
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