表达Cre酶复制缺陷型重组腺病毒载体的构建及鉴定

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目的 构建Cre-loxP条件性基因敲除系统中Cre酶的重组腺病毒表达载体,作为体细胞条件性基因敲除的基础,并为传统ES细胞条件性基因敲除提供新的选择。方法 用pAd-easy系统在大肠杆菌内经同源重组的方法构建Cre酶的复制缺陷型重组腺病毒载体;Western blot方法鉴定Cre蛋白的表达。结果 在大肠杆菌内构建出重组腺病毒质粒,在包装细胞系内包装出重组病毒颗粒;测定病毒滴度为106pfu/L;重组病毒在细胞内表达Cre蛋白。结论 表达Cre酶的重组腺病毒载体构建成功,阳性重组质粒的鉴定方法得以改进
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