外源性γ-氨基丁酸抵抗仔猪氧化应激的效果及机制

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【目的】研究外源性γ-氨基丁酸(GABA)抵抗仔猪氧化应激的作用效果,及海马神经元 GABA 受体调节凋亡信号通路在其中可能的介导作用,为 GABA 作为动物应激调节剂的应用提供科学依据。【方法】基于成功构建的仔猪活体和大鼠海马神经元氧化应激模型,考察外源性 GABA 对仔猪血清及海马组织中氧化/抗氧化相关指标、仔猪日增重、脑海马 GABA 受体以及大鼠海马神经元中 GABA 受体及凋亡信号通路相关基因表达水平的影响。【结果】低、中、高浓度的 GABA 灌喂组(LD+OS;MD+OS;HD+OS)仔猪血清的 MDA 含量均极显著低于氧化应激(OS)组(P<0.01),而 GSH 水平均极显著高于 OS 组(P<0.01),同时 HD+OS 组仔猪血清 T-AOC 水平极显著高于 OS 组和对照组(P<0.01);且高浓度(100 mg·kg-1 BW)GABA 降低仔猪血清 MDA含量和增加 GSH 水平的幅度均高于低浓度(20 mg·kg-1 BW)和中浓度(60 mg·kg-1 BW)GABA。因此,后续研究仅考察 100 mg·kg-1 BW GABA 的作用效果及其抗氧化应激的机制。OS 组仔猪 0-7、8-14 和 0-28 日龄的日增重极显著低于对照组(P<0.01),而 HD+OS组 0-7、8-14 和 0-28 日龄仔猪的日增重极显著高于 OS 组(P<0.01);OS 组仔猪 15-28 日龄的日增重显著低于对照组(P<0.05),HD+OS 组 15-28 日龄的日增重极显著高于 OS 组(P<0.01)。以上结果表明,100 mg·kg-1 BW GABA 的灌喂极显著地增加了仔猪的日增重。对照组、OS 组和 HD+OS 组在前、中、后期的腹泻率均无显著差异(P>0.05)。氧化应激组海马组织的 MDA含量极显著高于对照组和 HD+OS 组 (P<0.01),而 T-AOC 和 GSH 的水平均极显著低于另外两组(P<0.01),表明 GABA 能提高仔猪海马组织抗氧化能力。HD+OS 组的海马组织 GABAA和 GABAB受体水平均极显著高于对照组和氧化应激组(P<0.01),表明GABA 提高了海马组织 GABAA和 GABAB的水平。氧化应激组脑海马 Bcl-2 蛋白水平显著低于对照组(P<0.05),Bax 和 Caspase-3蛋白水平极显著高于对照组(P<0.01)。HD+OS 组的 Bcl-2 蛋白水平极显著高于氧化应激组(P<0.01),Bax 蛋白水平极显著低于氧化应激组(P<0.01),Caspase-3 蛋白水平显著低于氧化应激组(P<0.05)。与此一致的是,氧化应激组、GABA+OS+Picrotoxin 组和 GABA+OS+CGP54626 组大鼠海马神经元的 Bax 和 Caspase-3 蛋白水平均显著高于对照组和 GABA+OS组(P<0.05),表明 GABA 缓解了氧化应激状态下海马神经元的损伤,而 GABA 受体抑制剂的添加阻挡了 GABA 的抗应激损伤作用。【结论】GABA 降低了仔猪海马的氧化应激水平,而 GABA 抗应激的作用机制可能与其降低凋亡蛋白基因的表达相关,而 GABAA和 GABAB受体介导了该过程。
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