探讨双特异性酪氨酸磷酸化调节激酶1b (Dyrk1b）蛋白在不同程度子宫颈病变组织及子宫颈癌细胞中的表达及意义。
方法（1）组织标本检测：选取2011年1月至2013年12月间就诊于大连医科大学附属第一医院，经病理检查证实的子宫颈鳞癌75例（其中Ⅰ期60例，Ⅱ期15例）、低级别鳞状上皮内病变（LSIL) 12例、高级别鳞状上皮内病变（HSIL ）40例患者的石蜡组织标本；另取同期经病理检查确诊的28例慢性子宫颈炎患者的子宫颈组织为对照。采用免疫组化SP法检测不同程度子宫颈病变组织中Dyrk1b蛋白的表达情况，并分析子宫颈癌组织中Dyrk1b蛋白的表达与其不同临床病理指标的关系。（2）细胞实验：采用子宫颈癌细胞系HeLa和SiHa细胞，实验分为两组，实验组细胞中加入Dyrk1b抑制剂——AZ191，对照组细胞中不加AZ191。采用蛋白印迹法检测不同浓度（5、10 μmol/L）的AZ191作用后两组细胞中Dyrk1b蛋白的表达；四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法检测不同浓度（2.5、5、10、25、50、100 μmol/L）的AZ191作用后两组细胞的增殖情况；流式细胞仪检测不同浓度（5、10 μmol/L）的AZ191作用后两组细胞的凋亡情况。
结果（1）免疫组化SP法检测显示，慢性子宫颈炎、LSIL、HSIL和子宫颈鳞癌组织中Dyrk1b蛋白阳性表达率分别为11% （3/28）、1/12、42%（17/40 ）、71%（53/75），子宫颈鳞癌明显高于慢性子宫颈炎、LSIL、HSIL（P<0.01）；HSIL明显高于慢性子宫颈炎、LSIL （P<0.05）；而LSIL与慢性子宫颈炎比较，差异无统计学意义（P>0.05）。子宫颈鳞癌组织中Dyrk1b蛋白的表达与子宫颈肌层浸润深度显著相关（P<0.01），而与年龄、临床分期、淋巴结有无转移以及血清鳞状上皮细胞癌抗原（SCC-Ag）水平均无显著相关性（P>0.05）。（2）蛋白印迹法检测显示，不同浓度（5、10 μmol/L）的AZ191作用后，实验组HeLa和SiHa细胞中Dyrk1b蛋白的表达强度均随着AZ191浓度的增加而减弱，且均明显弱于对照组。MTT比色法检测显示，不同浓度（2.5、5、10、25、50、100 μmol/L ）的AZ191作用后，实验组HeLa和SiHa细胞增殖的抑制率随着AZ191浓度的增加均逐渐增高，呈明显的浓度依赖性（P<0.01）；且均明显高于对照组（P<0.05）。但实验组中同一浓度A2191作用后HeLa细胞与SiHa细胞增殖的抑制率分别比较，差异均无统计学意义（P>0.05）。流式细胞仪检测显示，5 μmol/L的AZ191作用后，实验组HeLa和SiHa细胞的凋亡率[分别为（12.8±0.7）%、（3.8±1.8）%]分别与对照组[分别为（9.1±0.9）%、（2.2±1.1 ）%]比较，差异均无统计学意义（P>0.05）；而10 μmol/L的AZ191作用后，实验组HeLa和SiHa细胞的凋亡率[分别为（15.5±1.1）%、（8.4±3.3）%]均明显高于对照组（P< 0.05）。但实验组中同一浓度AZ191作用后HeLa细胞与SiHa细胞的凋亡率分别比较，差异均无统计学意义（P>0.05）。
结论随着子宫颈病变程度的进展，Dyrk1b蛋白的表达逐渐增高，子宫颈癌组织和细胞中Dyrk1b蛋白均呈高表达；Dyrk1b抑制剂AZ191下调Dyrk1b蛋白表达后，可抑制子宫颈癌细胞的增殖，诱导细胞发生凋亡。