【摘 要】
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针对近海潮间带环境高盐、有机质组成复杂和微生物活性低的特点,根据微生物酶解荧光素双醋酸酯(FDA)产生荧光素的原理,建立了适于泥滩类潮间带沉积环境中微生物活性检测的荧
【机 构】
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中国海洋大学环境科学与工程学院; 中国海洋大学海洋环境与生态教育部重点实验室;
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(41176064)
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针对近海潮间带环境高盐、有机质组成复杂和微生物活性低的特点,根据微生物酶解荧光素双醋酸酯(FDA)产生荧光素的原理,建立了适于泥滩类潮间带沉积环境中微生物活性检测的荧光光度法.从样品浸提液、反应产物检测仪器、预处理方法、实验条件等不同方面进行优化,确定泥滩类潮间带沉积环境中微生物活性的最优检测方法和条件如下:沉积物湿样以灭菌陈海水为介质,加入吐温-80分散剂,充分振荡后静置,使较大颗粒自然沉降;取上层悬浊液,经无菌滤膜(1.2μm,多次煮沸灭菌)过滤,得到待测菌液;取待测菌液加入适量FDA溶液,在25~30℃下避光反应180 min,以丙酮为终止剂终止反应,25 min内以分子荧光光度计(激发波长488 nm,发射波长530 nm)测定反应产物的荧光强度,该方法的检测范围(以干重计)是3.0×103~1.1×105个·g-1.微生物活性以单位质量样品的荧光素含量表示(μg·g-1,干重).
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