【摘 要】
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旨在探究N-乙酰半胱氨酸(N-acetyl-L-cysteine,NAC)对山羊子宫内膜基质细胞(goat endometrial stro-mal cells,gESCs)的影响.本研究以山羊子宫内膜基质细胞为对象,体外培养基中添加浓度梯度分别为100、200、400μmol·L-1的NAC,将0μmol·L1 NAC视为空白组,运用CCK-8法筛选NAC的最适浓度并判断其对细胞的增殖情况,随后通过DCFH-DA探针、RT-qPCR分别检测最适浓度NAC对细胞内活性氧含量、细胞周期、增殖相关因子及山羊繁
【机 构】
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贵州大学高原山地动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室贵州省动物遗传育种与繁殖重点实验室,贵阳550025;贵州大学动物科学学院,贵阳550025
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旨在探究N-乙酰半胱氨酸(N-acetyl-L-cysteine,NAC)对山羊子宫内膜基质细胞(goat endometrial stro-mal cells,gESCs)的影响.本研究以山羊子宫内膜基质细胞为对象,体外培养基中添加浓度梯度分别为100、200、400μmol·L-1的NAC,将0μmol·L1 NAC视为空白组,运用CCK-8法筛选NAC的最适浓度并判断其对细胞的增殖情况,随后通过DCFH-DA探针、RT-qPCR分别检测最适浓度NAC对细胞内活性氧含量、细胞周期、增殖相关因子及山羊繁殖性能相关基因TGF-β1、TGF-β3 mRNA表达水平的影响.结果 表明:200 μmol·L-1 NAC浓度较其它梯度对山羊子宫内膜基质细胞增殖的影响更为显著,此外,200 μmol·L-1 NAC较空白组降低了细胞ROS的含量(P＜0.01),从而延缓细胞的衰老.RT-qPCR结果显示:200μmol·L-1 NAC添加能极显著提高细胞周期及增殖相关因子CyclinA1、CyclinE、PCNA mRNA的表达水平(P＜0.01),降低细胞周期因子CyclinD2的mRNA表达量(P＜0.01);并极显著降低转化生长因子家族TGF-β1基因(P＜0.01)、显著降低TGF-β3基因(P＜0.05)的mRNA表达水平.故本研究推测200 μmol·L-1 NAC可能通过调控细胞中CyclinA1、CyclinE、PCNA、CyclinD2的表达水平来促进细胞的增殖并通过调控转化生长家族因子TGFβ1、TGF-β3的表达水平影响山羊的繁殖性状,为进一步研究NAC对山羊繁殖性状的影响机理提供理论基础.
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