【摘 要】
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作为能量来源,脂质在卵母细胞成熟、胚胎发育和干细胞增殖中发挥着重要作用,猪卵母细胞和早期胚胎中存在丰富的脂质,但是其脂肪酸代谢的作用机制还知之甚少.本研究通过统计卵
【机 构】
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内蒙古大学省部共建草原家畜生殖调控与繁育国家重点实验室;
【基金项目】
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国家自然科学基金(No.81471001);动植物转基因材料价值评估项目(2016ZX08010005)资助项目
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作为能量来源,脂质在卵母细胞成熟、胚胎发育和干细胞增殖中发挥着重要作用,猪卵母细胞和早期胚胎中存在丰富的脂质,但是其脂肪酸代谢的作用机制还知之甚少.本研究通过统计卵母细胞的成熟率和体外受精的囊胚率,确定添加10%卵泡液是最优的卵母细胞成熟体系.通过检测电激活、电激活结合CB和9%乙醇分别作用3min、8min、11min等对卵裂率和囊胚率的影响,确定电激活(卵裂率为81.69%±0.41%,囊胚率为26.45%±0.28%)方式是最优的孤雌激活方案.免疫荧光染色显示孤雌囊胚的细胞核数目明显少于体外受精囊胚,对孤雌胚胎进行脂滴染色和脂滴含量检测的结果显示,脂滴定位于核周围,H2Av只存在于细胞核内,不存在于脂滴中,8-细胞时期脂滴直径达到最大,而桑椹胚中脂滴含量最高.对脂肪酸代谢相关基因的RT-PCR结果显示,与卵母细胞相比,FAS等基因表达量呈在胚胎发育各个时期呈上升趋势,ACADM等基因表达量呈下降趋势.本研究为深入了解脂肪酸代谢在早期胚胎发育过程中的作用机制奠定了基础.
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