【摘 要】
：
目的 制备汉滩病毒(Hantaan virus,HTNV)PS-6株小鼠单克隆抗体(monoclonal antibody,mAb),建立HT-NV抗原双抗体夹心ELISA检测方法,验证方法的检测性能并初步应用于疫苗抗原含量检测.方法 以HTNV PS-6株灭活全病毒原液作为免疫原,采用小鼠杂交瘤融合技术,筛选mAb杂交瘤细胞株,制备mAb;用间接ELISA测定mAb效价;用Western blot鉴定mAb特异性;用间接ELISA测定mAb相对亲和力;经抗体配对筛选,建立双抗体夹心ELISA病毒抗原检测
【机 构】
：
长春生物制品研究所有限责任公司生物技术研究室,吉林长春130012;长春生物制品研究所有限责任公司疫苗一室,吉林长春130012;长春生物制品研究所有限责任公司疫苗三室,吉林长春130012
论文部分内容阅读
目的 制备汉滩病毒(Hantaan virus,HTNV)PS-6株小鼠单克隆抗体(monoclonal antibody,mAb),建立HT-NV抗原双抗体夹心ELISA检测方法,验证方法的检测性能并初步应用于疫苗抗原含量检测.方法 以HTNV PS-6株灭活全病毒原液作为免疫原,采用小鼠杂交瘤融合技术,筛选mAb杂交瘤细胞株,制备mAb;用间接ELISA测定mAb效价;用Western blot鉴定mAb特异性;用间接ELISA测定mAb相对亲和力;经抗体配对筛选,建立双抗体夹心ELISA病毒抗原检测方法.以Ⅰ型肾综合征出血热疫苗标准品作为定量标准,验证该方法的检测限、线性范围、特异性、准确度、精密度;对6批次Ⅰ型肾综合征出血热灭活疫苗原液进行检测,初步验证该方法的适用性.结果 获得4株稳定分泌抗HTNV PS-6特异性抗体的阳性杂交瘤细胞株:4B2、3H8、5D7及2A7;间接ELISA检测腹水抗体效价均在1×106～1×107;Western blot鉴定4株mAb均能特异性识别HTNV PS-6;相对亲和力为4B2＞5D7＞3H8＞2A7;抗体ELISA配对筛选后,选用5D7作为包被抗体,4B2作为标记抗体,包被抗体工作浓度为10 μg/mL,HRP标记抗体工作浓度为1 ∶ 5 000.该方法对HTNV PS-6抗原检测限为0.039 1 μg/mL;检测线性范围为0.078 1～2.500 0 μg/mL,R2＞0.97;检测与Ⅰ型肾综合征出血热疫苗生产主要原辅料成分、Ⅱ型肾综合征出血热疫苗、森林脑炎疫苗及甲肝疫苗均无交叉反应;准确度验证,病毒抗原回收率在95.8％～110.5％之间;试验内和试验间精密度,CV分别在6.72％～8.03％、8.24％～9.70％之间.用该方法检测6批次1型肾综合征出血热灭活疫苗原液,结果均呈剂量依赖性.结论 成功制备HTNV PS-6株mAb,建立病毒抗原双抗体夹心ELISA抗原检测方法,方法准确、可靠,可初步应用于Ⅰ型肾综合征出血热灭活疫苗科研、生产过程病毒抗原检测.
其他文献
古诗词的意象挖掘与组织是目前数字人文研究的一个热点.诗人李白一生曾多次漫游金陵,创作了大量诗歌.通过对李白金陵诗歌的数字化解读与空间意象挖掘,能够再现历史文化名城的诗歌情境,传承文化印记.文本构建了“地名空间-诗歌意象”的地名空间意象分析框架,依托文献资料对李白金陵诗歌进行诗歌意象识别与地点甄别定位,并利用ArcMap10.2软件绘制出了李白金陵诗歌地图.在此基础上呈现出李白在金陵游历的空间特点,同时揭示了城市文化边界与空间意象的时空变化.
1980年,我国首次参加冬季奥运会,在1992年的第十六届冬奥会上开始斩获奖牌,此后在冬奥会的获奖数不断增加.但在冬奥会夺牌分项、基础项夺牌、具有较强影响力的冰球项目上与美国、德国、俄罗斯等冰雪竞技运动强国相比,依然存在—定的差距.因此,需要进一步借鉴国外冰雪人才培养与引进经验,健全人才培养机制,夯实冰雪人才发展体系.
Environmental DNA(eDNA)integrated with metabarcoding is a promising and powerful tool for species composition and biodiversity assessment in aquatic ecosystems and is increasingly applied to evaluate fish diversity.To date,however,no standardized eDNA-bas
The ability to sense temperature changes is crucial for mammalian survival.Mammalian thermal sensing is primarily carried out by thermosensitive transient receptor potential channels(Thermo-TRPs).Some mammals hibernate to survive cold winter conditions,du
Red tilapia(Oreochromis spp.)is one of the most popular fish in China due to its bright red appearance,fast growth rate,and strong adaptability.Understanding the sex determination mechanisms is of vital importance for the selection of all-male lines to in
电流引线是连接室温端电源和低温端超导装置的重要部件,也是超导装置热损耗的主要热源之一.选择合适的电流引线形式,并进行引线结构优化设计,可以提高超导装置的可靠性和经济性.概述了电流引线的优化设计目标和分类形式,介绍了全金属电流引线、高温超导电流引线和珀尔帖电流引线的研究进展,分析比较了三类电流引线的工作特点和适用场景,可为超导装置的电流引线选型和优化设计提供参考.
出土于19世纪下半叶的古埃及莎草纸文献《埃伯斯莎草纸》,是现存最早的医学书籍.该手稿抄写于公元前1500年左右,其中最早的内容可追溯至公元前3400年.它可能是古埃及皇家图书馆为保存易破损的莎草纸书籍而抄写的副本.本文对其版式、内容、研究进展进行了简要回顾.该手稿被认为是古希腊医学的源头,对于医学史研究及东西方医学比较研究,均有深远意义,具有较高的历史、文化、医学研究价值.目前对其进行的研究主要集中于翻译和文献考证,其医学价值仍有待探索.
在知识产权强国和创新驱动发展战略深入实施背景下,我国面临知识产权信息服务有效供给不足的现实困境.充分借鉴发达国家和地区知识产权信息公共服务体系方面的经验教训,有助于少走弯路.本研究着眼于我国知识产权信息公共服务体系建设的现实关切,系统梳理欧洲PATLIB中心发展历程和运营机制,归纳总结其特点,以期为我国知识产权信息公共服务体系建设提供借鉴.
接收捐赠是图书馆丰富馆藏的重要来源,挖掘潜在捐赠者及鼓励其持续捐赠是图书馆捐赠工作的重要内容.在情感互动视角下研究捐赠系统,对指导图书馆捐赠工作的开展,提高捐赠黏性具有重要意义.论文通过问卷形式的主、客观调查,对35位捐赠者进行情感互动对其捐赠动机影响的调研及相关意见采集,表明捐赠者普遍看重捐赠互动环节,捐赠反馈是与捐赠者进行情感互动的核心要素,捐赠动态查询、个人捐赠报告获取等需求次之.通过调研结果,论文设计了以情感互动为核心的图书馆捐赠系统的架构,提出个人主页、丰富的捐赠动态、多维度信息推送的特色需求,
全文下载量是目前最常用的数据库绩效评价指标,但这个指标是否能够准确有效地评估数据库的使用绩效呢?利用Web of Science平台获取数据库的引文量,通过Pearson(皮尔逊)积矩相关系数对华南理工大学图书馆馆藏外文期刊数据库的全文下载量和引文量进行相关性分析,验证全文下载量指标评估数据库使用绩效的有效性和准确性,为外文期刊数据库的使用绩效评估提供参考依据.全文下载量和引文量呈极强正相关关系,全文下载量指标评估数据库的使用绩效是客观有效的,使用连续多年的下载量数据可以提高评估结果的准确性.下载量结合引