维A酸通过上调脑源性神经营养因子促进小鼠胚胎干细胞向神经细胞分化的研究

来源 :中国临床药理学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:cangzhe
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目的 探讨维A酸对小鼠胚胎干细胞发生神经分化的影响及机制。方法 用1μmol·L-1维A酸对小鼠胚胎干细胞E14Tg2A.4处理0和5 d,分别标记为对照组和实验组。用脂质体法将si-NC、si-BDNF、pcDNA、pcDNA-BDNF、si-BDNF+NS(转染si-BDNF并用0.9%NaCl处理5 d)、si-BDNF+RA(转染si-BDNF并用1μmol·L-1维A酸处理5 d)转染至E14Tg2A.4细胞,转染成功后分别标记为si-NC组、si-BDNF组、pcDNA组、pcDNA-BDNF组、si-BDNF+NS组、si-BDNF+RA组。用实时荧光定量聚合酶链反应法检测sox2、nestin和tuj1 mRNA的表达水平,用Western blot法检测脑源性神经营养因子(BDNF)蛋白的表达水平。结果 对照组、实验组、si-NC组、si-BDNF组、pcDNA组、pcDNA-BDNF组、si-BDNF+NS组和si-BDNF+RA组的sox2 mRNA相对表达量分别为1.00±0.06,0.16±0.01,1.00±0.08,0.32±0.03,1.00±0.07,0.32±0.03,1.01±0.07和0.72±0.06,nestin mRNA相对表达量分别为1.00±0.08,1.94±0.14,1.01±0.06,1.98±0.16,1.01±0.06,1.98±0.16,1.02±0.08和1.32±0.09,tuj1 mRNA相对表达量分别为1.01±0.08,2.64±0.23,1.01±0.09,1.98±0.14,0.99±0.09,1.98±0.14,1.02±0.07和1.61±0.12,BDNF蛋白相对表达量分别为1.00±0.09,3.16±0.28,1.00±0.07,0.35±0.03,1.01±0.06,3.86±0.34,1.02±0.09和1.81±0.13。实验组的上述指标与对照组比较,si-BDNF组的上述指标与si-NC组比较,pcDNA-BDNF组的上述指标与pcDNA组比较,si-BDNF+RA组的上述指标与si-BDNF+NS组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论 维A酸可通过上调BDNF表达,促进小鼠胚胎干细胞发生神经分化。
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