【摘 要】
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目的：探讨长链非编码RNA-PCAT6（lncRNA-PCAT6）对肺癌A549细胞上皮间质转化（EMT）和化疗敏感性的影响，以及对微小RNA-185（miR-185）/SIX1轴的调控作用。方法：取A549细胞，分为空白组、lncRNA-PCAT6低表达腺病毒（PCAT6-Si）组、不含lncRNA-PCAT6-Si的空病毒载体（eGFP-Si-1）组、miR-185低表达腺病毒（miR-185
【机 构】
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中南大学湘雅医学院附属海口医院呼吸内科
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目的：探讨长链非编码RNA-PCAT6（lncRNA-PCAT6）对肺癌A549细胞上皮间质转化（EMT）和化疗敏感性的影响，以及对微小RNA-185（miR-185）/SIX1轴的调控作用。方法：取A549细胞，分为空白组、lncRNA-PCAT6低表达腺病毒（PCAT6-Si）组、不含lncRNA-PCAT6-Si的空病毒载体（eGFP-Si-1）组、miR-185低表达腺病毒（miR-185-Si）组、不含miR-185-Si的空病毒载体（eGFP-Si-2）组、PCAT6-Si与miR-185-Si共转染（PCAT6-Si+miR-185-Si）组。RT-qPCR法检测lncRNA-PCAT6、miR-185表达；Transwell法测定细胞侵袭、迁移能力；免疫荧光检测EMT标志物N-cadherin阳性表达；Western blot法测定SIX1、EMT标志蛋白E-cadherin、Vimentin及N-cadherin表达。取A549细胞系及其顺铂耐药细胞株A549/DDP,RT-qPCR及Western blot法检测lncRNA-PCAT6、miR-185表达。取A549/DDP转染PCAT6-Si与miR-185-Si，并分为A549组、A549/DDP组、PCAT6-Si组、miR-185-Si组、PCAT6-Si+miR-185-Si、eGFP-Si-1组、eGFP-Si-2组；RT-qPCR检测lncRNA-PCAT6、miR-185表达；CCK-8法检测各组细胞半数抑制浓度(IC50)及耐药指数（RI）;Western blot法检测SIX1、耐药相关蛋白P-gp表达；裸鼠荷瘤试验验证PCAT6对A549/DDP细胞化疗敏感性的作用。双荧光素酶试验验证PCAT6与miR-185之间的靶向关系。结果：与A549细胞相比，A549/DDP细胞IC50及RI、lncRNA-PCAT6、SIX1及P-gp表达升高（P＜0.05）,miR-185表达降低（P＜0.05）。敲低A549细胞中lncRNA-PCAT6表达后，miR-185表达升高，SIX1蛋白表达降低，细胞侵袭、迁移能力及EMT进程降低，IC50及RI降低、肿瘤体积减小，且各指标变化差异显著（P＜0.05）。敲低miR-185可逆转lncRNA-PCAT6的上述作用。双荧光素酶报告试验证实lncRNAPCAT6与miR-185之间有靶向负调控作用。结论：肺癌A549细胞中lncRNA-PCAT6低表达可靶向上调miR-185，下调SIX1，抑制EMT进程，增强对DDP化疗的敏感性。
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