CaMKKβ 通过激活 AMPK/JAK2/STAT3 信号促进小鼠单核巨噬细胞向 M2 表型转换

来源 :上海交通大学学报(医学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户:jiayunhe
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目的·探明钙离子/钙调蛋白依赖性蛋白激酶激酶β(CaMKKβ)在白介素4(IL-4)诱导的RAW264.7细胞极化过程中的作用和机制。方法·RT-PCR和ELISA检测IL-4诱导RAW264.7细胞极化水平,Western blotting测定极化过程中CaMKKβ、AMPK、JAK2、STAT3蛋白表达及磷酸化水平。慢病毒为载体的shRNA稳定干扰RAW264.7细胞CaMKKβ表达,RT-PCR和ELISA检测IL-4诱导下细胞极化水平的改变,Western blotting检测AMPK、JAK2、STAT3蛋白及磷酸化蛋白的表达。分别特异性阻断AMPK、JAK2和STAT3蛋白活性,经RT-PCR检测IL-4诱导下RAW264.7细胞极化水平的改变。结果·IL-4主要诱导RAW264.7细胞向M2型巨噬细胞极化(P<0.05),且CaMKKβ、AMPK、JAK2、STAT3的磷酸化水平明显升高(均P<0.05)。shRNA稳定干扰RAW264.7细胞CaMKKβ表达后,IL-4促进巨噬细胞向M2型极化作用降低(P<0.05),且AMPK、JAK2和STAT3的磷酸化水平降低(均P<0.05)。分别阻断AMPK、JAK2和STAT3,巨噬细胞向M2型极化减少(均P<0.05)。结论·CaMKKβ通过激活AMPK/JAK2/STAT3信号通路,促进IL-4诱导的巨噬细胞M2型极化。
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