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摘要
本研究利用室内毒力测定法测定了白术角担菌对8种杀菌剂的敏感性，同时开展田间试验测定了8种杀菌剂对白术根腐病的防治效果。结果表明：50%多菌灵可湿性粉剂、40%五硝·多菌灵可湿性粉剂、30%苯甲·丙环唑乳油和430 g/L戊唑醇悬浮剂对角担菌的菌丝抑制率相对较高，EC50均低于10 mg/L。田间试验结果表明：末次施药20 d后40%五硝· 多菌灵可湿性粉剂1 000倍液、50%多菌灵可湿性粉剂1 000倍液、30%苯甲·丙环唑乳油2 000倍液和430 g/L戊唑醇悬浮剂 3 000倍液的防效均超过58%，而且防效之间无显著性差异，各药剂处理对白术的生长无显著性影响。
关键词
白术；杀菌剂；根腐病；角担菌；防治
中图分类号：
S 482.2
文献标识码：B
DOI：10.3969/j.issn.05291542.2016.06.043
Abstract
Sensitivity of Ceratobasidium sp. to 8 kinds of fungicides was measured in the laboratory， and control effects of 8 fungicides on root rot of A.macrocephala were investigated by field experiment. The results showed that 50% carbendazim WP， 40% quintozene·carbendazim WP， 430 g/L tebuconazole SC， and 30% difenoconazole·propiconazol EC could effectively inhibit the growth of Ceratobasidium sp， with the EC50 values of less than 10 mg/L.The field trial demonstrated that 40% quintozene·carbendazim WP （1 000×）， 50% carbendazim WP （1 000×）， 30% difenoconazole·propiconazol EC （2 000×）and 430 g/L tebuconazole SC （3 000×） had better control effect than others 20 days after the final fungicides application， with the control efficacy of more than 58%， and there is no significant difference among their control efficacies. The fungicides had no significant effect on the growth of Atractylodes macrocephala.
Key words
Atractylodes macrocephala；fungicides；root rot；Ceratobasidium sp.；control
白术（Atractylodes macrocephala）为菊科苍术属植物白术的干燥根茎，在我国湖北、安徽、浙江、江西、湖南、四川等地区均有栽培[1]。白术具有健脾益气、燥湿利水、止汗安胎之功效，用于脾虚食少、腹胀泄泻、水肿、自汗、胎动不安等症，生用或炮制，具有重要的药用价值，是中医“参、术、苓、甘”四大名贵药材之一。恩施土家族苗族自治州咸丰县白术系湖北省特产，具有有效成分含量高、绿色无污染、加工饮片形状好、质地均匀坚实等质量优势。2007年5月，国家质检总局发布公告，正式批准对咸丰白术实施地理标志产品保护。白术根腐病一直困扰白术产业的进一步壮大和发展，前人报道白术根腐病致病菌为尖孢镰刀菌（Fusarium oxysporum）和齐整小核菌（Selerotium rolfsii Sacc），同时开展了防治研究，但是防效不理想[24]。笔者从2010年开始调查恩施州及周边地区白术根腐病发生情况，证明根腐病导致白术平均减产15%以上，有些田块的损失超过40%；并于2013年通过调查及试验证明造成恩施州白术根腐病的主要致病菌为角担菌（Ceratobasidium sp.）[5]，这是在国内首次报道该菌可以导致白术根腐病。随着精准扶贫的开展，发展中药材产业成为贫困山区重要的扶贫途径。白术作为湖北省优势道地药材，是恩施土家族苗族自治州主推中药材之一。目前针对角担菌防治的研究较少，为减少白术种植中化学药剂使用的盲目性，筛选出防治角担菌的理想药剂，建立白术安全控害体系，为精准扶贫保驾护航，特开展本研究。
1材料与方法
1.1供试作物及菌株
供试作物为咸丰‘鸡腿白术’；供试病原菌菌株为白术角担菌（Ceratobasidium sp.）BZ1，由湖北省农科院中药材研究所分离鉴定保存。
1.2供试杀菌剂
50%多菌灵可湿性粉剂，四川国光农化股份有限公司；40%五硝·多菌灵可湿性粉剂，惠州市中迅化工有限公司；8%噁霉灵水剂，陕西西大华特科技实业有限公司；30%甲霜·噁霉灵水剂，中农住商（天津）农用化学品有限公司；430 g/L戊唑醇悬浮剂，江苏剑牌农化股份有限公司；30%苯甲·丙环唑乳油，湖南绿叶化工有限公司；40%菌核净可湿性粉剂，河南倍尔农化有限公司；20%井冈霉素可溶粉剂，浙江钱江生物化学股份有限公司。
1.3杀菌剂对角担菌菌丝生长的影响 将1.2中杀菌剂与PDA（马铃薯葡萄糖琼脂）培养基按照一定比例混合，依次稀释为5个浓度梯度（表1）。将角担菌BZ1菌株活化后，取直径0.5 cm的菌丝块接种于含不同浓度杀菌剂的培养基中央，空白PDA作为对照，每处理4个重复，置于28℃培养72 h，利用十字交叉法测定各个处理菌落直径，计算抑制率。所得数据经Finney几率分析法和DPS统计软件进行数据处理，求出各单剂毒力回归方程、EC50及相关系数（r）。菌落生长抑制率（%）=（对照菌落直径-药剂处理菌落直径）/对照菌落直径×100。
1.4杀菌剂田间防效试验
试验点设在湖北咸丰道地药材开发有限公司试验田。前茬作物为白术，从上年发生根腐病的白术上分离的致病菌主要为角担菌，种植过程中各项操作均一致，不使用其他化学药剂。种植时间为2013年3月20日，天气晴，选择一年生大小均一的白术根茎移栽，栽前用供试药剂按照产品推荐浓度（表2）浸种30 min，晾干后种植。试验共设置27个小区，每小区面积为15 m2，10株/m2，共150株，设3个重复，以清水为阴性对照。于2013年4月20日按照各药剂推荐浓度灌根，每株约50 mL，施用3次，间隔7 d，末次药后10 d和20 d统计发病率及病情指数，每小区5点取样，每点调查10株。分级标准：0级，无病；1级，根茎有少量病斑；3级，根茎病斑较多，维管束褐色，尚未木质化；5级，病根有部分开始腐烂，腐烂部分占根茎体积30%以下；7级，腐烂部分占根茎体积30%以上，地上部植株萎蔫变黄；9级：根茎腐烂，植株枯死[2]。根据分级标准计算各药剂的防效。
病情指数=100×Σ（各级病株数×各级代表值）/（总株数×最高病级代表值）；
防效（%）=100×（对照病情指数-处理病情指数）/对照病情指数。
1.5杀菌剂对白术生长的影响
末次药后30 d，调查供试杀菌剂对白术生长的影响，每小区五点取样，每点取 2株，统计平均株高及根茎鲜重，同时观察是否有药害产生。
2结果与分析
2.1杀菌剂对角担菌菌丝生长的影响
将毒力最低的20%井冈霉素可溶粉剂的毒力倍数设为1。8种杀菌剂室内毒力测定结果表明：50%多菌灵可湿性粉剂、40%五硝·多菌灵可湿性粉剂、30%苯甲·丙环唑乳油和430 g/L戊唑醇悬浮剂的EC50低于10 mg/L，分别为0.14、0.48、6.21 mg/L和7.09 mg/L；30%甲霜·噁霉灵水剂、8%噁霉灵水剂以及40%菌核净可湿性粉剂的EC50介于25～56 mg/L之间；20%井冈霉素可溶粉剂的EC50最高，为237.21 mg/L。
2.2杀菌剂田间试验结果
田间试验证明，末次施药后10 d，8种药剂中50%多菌灵可湿性粉剂1 000倍液、430 g/L戊唑醇悬浮剂3 000倍液、40%五硝·多菌灵可湿性粉剂1 000倍液和30%苯甲·丙环唑乳油2 000倍液的防效较高，分别为67.37%、65.07%、64.88%和63.53%，方差分析表明这4种药剂防效之间无显著性差异。其他4种药剂的防效均低于45%，其中20%井冈霉素可溶粉剂的防效最低，仅为33.21%。末次药后20 d 40%五硝·多菌灵可湿性粉剂、50%多菌灵可湿性粉剂、30%苯甲· 丙环唑乳油和430 g/L戊唑醇悬浮剂的防效较好，分别为60.04%、59.07%、58.98%和58.45%，方差分析表明4种药剂防效之间无显著性差异。其他几种药剂的防效均低于32%。
2.3杀菌剂对白术生长的影响
末次药后30 d对白术株高进行测量，50%多菌灵可湿性粉剂处理的平均株高最高，为32.24 cm，8%噁霉灵水剂处理的平均株高最低，为31.71 cm，但各处理间均无显著性差异；430 g/L戊唑醇悬浮剂处理的平均根茎鲜重最大，为16.77 g；40%菌核净可湿性粉剂处理的平均鲜重最低，为16.39 g，但各处理之间也无显著性差异（表5）。
3结论与讨论
现阶段针对角担菌药剂筛选研究相对较少，本研究室内毒力测定结果表明50%多菌灵可湿性粉剂、430 g/L戊唑醇悬浮剂、40%五硝·多菌灵可湿性粉剂和30%苯甲·丙环唑乳油对白术角担菌的菌丝抑制效果明显，EC50均低于10 mg/L。田间防效试验结果显示，50%多菌灵可湿性粉剂、430 g/L戊唑醇悬浮剂、40%五硝·多菌灵可湿性粉剂和30%苯甲·丙环唑乳油的防效较好，均超过58%。各供试药剂对白术的株高和产量无显著性影响，无药害产生，该4种药剂可以作为恩施州白术根腐病田间防治主推药剂。
前人研究大多认为白术根腐病致病菌主要是尖孢镰刀菌和齐整小核菌，但是笔者室内分离研究证明镰刀菌引起的白术根腐病在恩施白术种植区约占分离的总致病菌数的6%，角担菌占90%，致病菌的差异可能与白术种植区的海拔、田间气候、水土有关。杨成前等报道50%多菌灵可湿性粉剂在田间对白术根腐病有较好的防效[67]，和我们的田间防效研究结果一致，但其研究是以尖孢镰刀菌为目标菌。同时三唑类杀菌剂戊唑醇及苯甲·丙环唑对白术根腐病的防治研究鲜有报道，本研究证明戊唑醇及苯甲·丙环唑对白术根腐病有较好的防效。在白术根腐病的田间防治中，多菌灵作为广谱杀菌剂目前用量最大，使用频率最高，存在使病原菌抗药性增加的风险，为了降低病原菌抗药性产生的几率，减少环境压力，建议在防治白术根腐病时，将多菌灵与三唑类杀菌剂轮换使用。
参考文献
[1]国家药典委员会. 中华人民共和国药典[M]. 北京： 中国医药科技出版社， 2010： 96.
[2]张雯晴， 杨秀峰， 颜兴贵， 等. 不同药剂防治白术根腐病和白绢病试验研究[J]. 种子， 2004， 23（5）： 4952.
[3]刘英慧， 赵来顺. 白术根腐病研究初报[J].植物病理学报， 1990， 21（1）： 63.
[4]段明华， 原雅玲， 赵锦丽， 等. 白术根茎腐烂与栽培措施的相关性[J]. 西北植物学报， 1996， 16（5）：2427.
[5]You Jingmao， Lin Xianming， Guo Jie.First report of root rot on Atractylodes macrocephala （Largehead Atractylodes Rhizome） caused by Ceratobasidium sp. in China [J]. Plant Disease， 2013， 97（1）：139.
[6]杨成前， 宋廷杰， 吴中宝， 等. 白术根腐病发生危害与防治调查[J]. 中药材， 2007， 20（5）：517519.
[7]李德新， 齐巧丽， 安信伯， 等. 药剂处理种栽及生物防治白术根腐病研究[J]. 安徽农业科学， 2008， 36（15）：63726373.
（责任编辑：杨明丽）
本研究利用室内毒力测定法测定了白术角担菌对8种杀菌剂的敏感性，同时开展田间试验测定了8种杀菌剂对白术根腐病的防治效果。结果表明：50%多菌灵可湿性粉剂、40%五硝·多菌灵可湿性粉剂、30%苯甲·丙环唑乳油和430 g/L戊唑醇悬浮剂对角担菌的菌丝抑制率相对较高，EC50均低于10 mg/L。田间试验结果表明：末次施药20 d后40%五硝· 多菌灵可湿性粉剂1 000倍液、50%多菌灵可湿性粉剂1 000倍液、30%苯甲·丙环唑乳油2 000倍液和430 g/L戊唑醇悬浮剂 3 000倍液的防效均超过58%，而且防效之间无显著性差异，各药剂处理对白术的生长无显著性影响。
关键词
白术；杀菌剂；根腐病；角担菌；防治
中图分类号：
S 482.2
文献标识码：B
DOI：10.3969/j.issn.05291542.2016.06.043
Abstract
Sensitivity of Ceratobasidium sp. to 8 kinds of fungicides was measured in the laboratory， and control effects of 8 fungicides on root rot of A.macrocephala were investigated by field experiment. The results showed that 50% carbendazim WP， 40% quintozene·carbendazim WP， 430 g/L tebuconazole SC， and 30% difenoconazole·propiconazol EC could effectively inhibit the growth of Ceratobasidium sp， with the EC50 values of less than 10 mg/L.The field trial demonstrated that 40% quintozene·carbendazim WP （1 000×）， 50% carbendazim WP （1 000×）， 30% difenoconazole·propiconazol EC （2 000×）and 430 g/L tebuconazole SC （3 000×） had better control effect than others 20 days after the final fungicides application， with the control efficacy of more than 58%， and there is no significant difference among their control efficacies. The fungicides had no significant effect on the growth of Atractylodes macrocephala.
Key words
Atractylodes macrocephala；fungicides；root rot；Ceratobasidium sp.；control
白术（Atractylodes macrocephala）为菊科苍术属植物白术的干燥根茎，在我国湖北、安徽、浙江、江西、湖南、四川等地区均有栽培[1]。白术具有健脾益气、燥湿利水、止汗安胎之功效，用于脾虚食少、腹胀泄泻、水肿、自汗、胎动不安等症，生用或炮制，具有重要的药用价值，是中医“参、术、苓、甘”四大名贵药材之一。恩施土家族苗族自治州咸丰县白术系湖北省特产，具有有效成分含量高、绿色无污染、加工饮片形状好、质地均匀坚实等质量优势。2007年5月，国家质检总局发布公告，正式批准对咸丰白术实施地理标志产品保护。白术根腐病一直困扰白术产业的进一步壮大和发展，前人报道白术根腐病致病菌为尖孢镰刀菌（Fusarium oxysporum）和齐整小核菌（Selerotium rolfsii Sacc），同时开展了防治研究，但是防效不理想[24]。笔者从2010年开始调查恩施州及周边地区白术根腐病发生情况，证明根腐病导致白术平均减产15%以上，有些田块的损失超过40%；并于2013年通过调查及试验证明造成恩施州白术根腐病的主要致病菌为角担菌（Ceratobasidium sp.）[5]，这是在国内首次报道该菌可以导致白术根腐病。随着精准扶贫的开展，发展中药材产业成为贫困山区重要的扶贫途径。白术作为湖北省优势道地药材，是恩施土家族苗族自治州主推中药材之一。目前针对角担菌防治的研究较少，为减少白术种植中化学药剂使用的盲目性，筛选出防治角担菌的理想药剂，建立白术安全控害体系，为精准扶贫保驾护航，特开展本研究。
1材料与方法
1.1供试作物及菌株
供试作物为咸丰‘鸡腿白术’；供试病原菌菌株为白术角担菌（Ceratobasidium sp.）BZ1，由湖北省农科院中药材研究所分离鉴定保存。
1.2供试杀菌剂
50%多菌灵可湿性粉剂，四川国光农化股份有限公司；40%五硝·多菌灵可湿性粉剂，惠州市中迅化工有限公司；8%噁霉灵水剂，陕西西大华特科技实业有限公司；30%甲霜·噁霉灵水剂，中农住商（天津）农用化学品有限公司；430 g/L戊唑醇悬浮剂，江苏剑牌农化股份有限公司；30%苯甲·丙环唑乳油，湖南绿叶化工有限公司；40%菌核净可湿性粉剂，河南倍尔农化有限公司；20%井冈霉素可溶粉剂，浙江钱江生物化学股份有限公司。
1.3杀菌剂对角担菌菌丝生长的影响 将1.2中杀菌剂与PDA（马铃薯葡萄糖琼脂）培养基按照一定比例混合，依次稀释为5个浓度梯度（表1）。将角担菌BZ1菌株活化后，取直径0.5 cm的菌丝块接种于含不同浓度杀菌剂的培养基中央，空白PDA作为对照，每处理4个重复，置于28℃培养72 h，利用十字交叉法测定各个处理菌落直径，计算抑制率。所得数据经Finney几率分析法和DPS统计软件进行数据处理，求出各单剂毒力回归方程、EC50及相关系数（r）。菌落生长抑制率（%）=（对照菌落直径-药剂处理菌落直径）/对照菌落直径×100。
1.4杀菌剂田间防效试验
试验点设在湖北咸丰道地药材开发有限公司试验田。前茬作物为白术，从上年发生根腐病的白术上分离的致病菌主要为角担菌，种植过程中各项操作均一致，不使用其他化学药剂。种植时间为2013年3月20日，天气晴，选择一年生大小均一的白术根茎移栽，栽前用供试药剂按照产品推荐浓度（表2）浸种30 min，晾干后种植。试验共设置27个小区，每小区面积为15 m2，10株/m2，共150株，设3个重复，以清水为阴性对照。于2013年4月20日按照各药剂推荐浓度灌根，每株约50 mL，施用3次，间隔7 d，末次药后10 d和20 d统计发病率及病情指数，每小区5点取样，每点调查10株。分级标准：0级，无病；1级，根茎有少量病斑；3级，根茎病斑较多，维管束褐色，尚未木质化；5级，病根有部分开始腐烂，腐烂部分占根茎体积30%以下；7级，腐烂部分占根茎体积30%以上，地上部植株萎蔫变黄；9级：根茎腐烂，植株枯死[2]。根据分级标准计算各药剂的防效。
病情指数=100×Σ（各级病株数×各级代表值）/（总株数×最高病级代表值）；
防效（%）=100×（对照病情指数-处理病情指数）/对照病情指数。
1.5杀菌剂对白术生长的影响
末次药后30 d，调查供试杀菌剂对白术生长的影响，每小区五点取样，每点取 2株，统计平均株高及根茎鲜重，同时观察是否有药害产生。
2结果与分析
2.1杀菌剂对角担菌菌丝生长的影响
将毒力最低的20%井冈霉素可溶粉剂的毒力倍数设为1。8种杀菌剂室内毒力测定结果表明：50%多菌灵可湿性粉剂、40%五硝·多菌灵可湿性粉剂、30%苯甲·丙环唑乳油和430 g/L戊唑醇悬浮剂的EC50低于10 mg/L，分别为0.14、0.48、6.21 mg/L和7.09 mg/L；30%甲霜·噁霉灵水剂、8%噁霉灵水剂以及40%菌核净可湿性粉剂的EC50介于25～56 mg/L之间；20%井冈霉素可溶粉剂的EC50最高，为237.21 mg/L。
2.2杀菌剂田间试验结果
田间试验证明，末次施药后10 d，8种药剂中50%多菌灵可湿性粉剂1 000倍液、430 g/L戊唑醇悬浮剂3 000倍液、40%五硝·多菌灵可湿性粉剂1 000倍液和30%苯甲·丙环唑乳油2 000倍液的防效较高，分别为67.37%、65.07%、64.88%和63.53%，方差分析表明这4种药剂防效之间无显著性差异。其他4种药剂的防效均低于45%，其中20%井冈霉素可溶粉剂的防效最低，仅为33.21%。末次药后20 d 40%五硝·多菌灵可湿性粉剂、50%多菌灵可湿性粉剂、30%苯甲· 丙环唑乳油和430 g/L戊唑醇悬浮剂的防效较好，分别为60.04%、59.07%、58.98%和58.45%，方差分析表明4种药剂防效之间无显著性差异。其他几种药剂的防效均低于32%。
2.3杀菌剂对白术生长的影响
末次药后30 d对白术株高进行测量，50%多菌灵可湿性粉剂处理的平均株高最高，为32.24 cm，8%噁霉灵水剂处理的平均株高最低，为31.71 cm，但各处理间均无显著性差异；430 g/L戊唑醇悬浮剂处理的平均根茎鲜重最大，为16.77 g；40%菌核净可湿性粉剂处理的平均鲜重最低，为16.39 g，但各处理之间也无显著性差异（表5）。
3结论与讨论
现阶段针对角担菌药剂筛选研究相对较少，本研究室内毒力测定结果表明50%多菌灵可湿性粉剂、430 g/L戊唑醇悬浮剂、40%五硝·多菌灵可湿性粉剂和30%苯甲·丙环唑乳油对白术角担菌的菌丝抑制效果明显，EC50均低于10 mg/L。田间防效试验结果显示，50%多菌灵可湿性粉剂、430 g/L戊唑醇悬浮剂、40%五硝·多菌灵可湿性粉剂和30%苯甲·丙环唑乳油的防效较好，均超过58%。各供试药剂对白术的株高和产量无显著性影响，无药害产生，该4种药剂可以作为恩施州白术根腐病田间防治主推药剂。
前人研究大多认为白术根腐病致病菌主要是尖孢镰刀菌和齐整小核菌，但是笔者室内分离研究证明镰刀菌引起的白术根腐病在恩施白术种植区约占分离的总致病菌数的6%，角担菌占90%，致病菌的差异可能与白术种植区的海拔、田间气候、水土有关。杨成前等报道50%多菌灵可湿性粉剂在田间对白术根腐病有较好的防效[67]，和我们的田间防效研究结果一致，但其研究是以尖孢镰刀菌为目标菌。同时三唑类杀菌剂戊唑醇及苯甲·丙环唑对白术根腐病的防治研究鲜有报道，本研究证明戊唑醇及苯甲·丙环唑对白术根腐病有较好的防效。在白术根腐病的田间防治中，多菌灵作为广谱杀菌剂目前用量最大，使用频率最高，存在使病原菌抗药性增加的风险，为了降低病原菌抗药性产生的几率，减少环境压力，建议在防治白术根腐病时，将多菌灵与三唑类杀菌剂轮换使用。
参考文献
[1]国家药典委员会. 中华人民共和国药典[M]. 北京： 中国医药科技出版社， 2010： 96.
[2]张雯晴， 杨秀峰， 颜兴贵， 等. 不同药剂防治白术根腐病和白绢病试验研究[J]. 种子， 2004， 23（5）： 4952.
[3]刘英慧， 赵来顺. 白术根腐病研究初报[J].植物病理学报， 1990， 21（1）： 63.
[4]段明华， 原雅玲， 赵锦丽， 等. 白术根茎腐烂与栽培措施的相关性[J]. 西北植物学报， 1996， 16（5）：2427.
[5]You Jingmao， Lin Xianming， Guo Jie.First report of root rot on Atractylodes macrocephala （Largehead Atractylodes Rhizome） caused by Ceratobasidium sp. in China [J]. Plant Disease， 2013， 97（1）：139.
[6]杨成前， 宋廷杰， 吴中宝， 等. 白术根腐病发生危害与防治调查[J]. 中药材， 2007， 20（5）：517519.
[7]李德新， 齐巧丽， 安信伯， 等. 药剂处理种栽及生物防治白术根腐病研究[J]. 安徽农业科学， 2008， 36（15）：63726373.
（责任编辑：杨明丽）