【摘 要】
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目的:用过氧化氢建立人脐静脉内皮细胞(HUVEC)凋亡模型,加以原花青素(procyanidin)干预,研究原花青素是否对过氧化氢诱导的内皮细胞凋亡有抑制作用并探讨其机制。方法:体外培
【机 构】
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浙江中医药大学附属第一医院急诊科,
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目的:用过氧化氢建立人脐静脉内皮细胞(HUVEC)凋亡模型,加以原花青素(procyanidin)干预,研究原花青素是否对过氧化氢诱导的内皮细胞凋亡有抑制作用并探讨其机制。方法:体外培养人脐静脉内皮细胞,将细胞分为6组,即空白对照组(Control)、氧化损伤组(H2O2)、氧化损伤加入VitC对照组(VC+H2O2)、氧化损伤加入原花青素5、25、50μmol/L浓度组(procyanidin-L+H2O2、procyanidin-M+H2O2、procyanidin-H+H2O2)。将750μmol/LH2O2作用于加入VitC及不同浓度原花青素预培养24 h的内皮细胞,继续培养18 h(半胱氨酸蛋白酶表达测定时间为14 h),以吖啶橙/溴化乙锭(AO/EB)双荧光染色显微镜观察法、AnnexinV/PI流式细胞术检测细胞凋亡,并采用Western blot方法检测Caspase-3、Bcl-xl、Bax蛋白的表达。结果:原花青素呈剂量依赖性抑制H2O2诱导的内皮细胞的凋亡,并显著下调Caspase-3、Bax蛋白表达,明显上调Bcl-xl蛋白表达,并呈剂量依赖性,各指标差异有显著性(P<0.01)。结论:原花青素能抑制过氧化氢诱导的血管内皮细胞的凋亡,其作用可能与下调Casapase-3表达,升高Bcl-xl/Bax比值有关。
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