【摘 要】
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目的 探讨速效救心丸对缺氧/复氧心肌细胞的保护作用及可能机制.方法 将H9c2细胞随机分为5组,分别为常氧组、缺氧/复氧组、速效+缺氧/复氧组、川芎嗪+缺氧/复氧组、冰片+缺氧/复氧组.通过RT-qPCR和Western blot检测RNA去甲基化酶ALKBH5 mRNA和蛋白的表达.为进一步研究,将H9c2细胞分为空白转染+常氧组、空白转染+缺氧/复氧组、空白转染+速效+缺氧/复氧组、空白转染+川芎嗪+缺氧/复氧组、空白转染+冰片+缺氧/复氧组、ALKBH5过表达+缺氧/复氧组、ALKBH5过表达+速效
【机 构】
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上海中医药大学附属曙光医院, 国家中医心血管病临床医学研究中心分中心, 上海 201203;上海中医药大学附属曙光医院心血管病研究所, 上海201203
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目的 探讨速效救心丸对缺氧/复氧心肌细胞的保护作用及可能机制.方法 将H9c2细胞随机分为5组,分别为常氧组、缺氧/复氧组、速效+缺氧/复氧组、川芎嗪+缺氧/复氧组、冰片+缺氧/复氧组.通过RT-qPCR和Western blot检测RNA去甲基化酶ALKBH5 mRNA和蛋白的表达.为进一步研究,将H9c2细胞分为空白转染+常氧组、空白转染+缺氧/复氧组、空白转染+速效+缺氧/复氧组、空白转染+川芎嗪+缺氧/复氧组、空白转染+冰片+缺氧/复氧组、ALKBH5过表达+缺氧/复氧组、ALKBH5过表达+速效+缺氧/复氧组、ALKBH5过表达+川芎嗪+缺氧/复氧组、ALKBH5过表达+冰片+缺氧/复氧组.通过化学发光法检测细胞活力,比色法检测N6-腺嘌呤(m6A)甲基化水平,RT-qPCR检测自噬相关基因的表达.结果 与模型组比较,速效救心丸及其有效成分川芎嗪、冰片预处理与ALKBH5过表达可以增加缺氧/复氧后心肌细胞去甲基化酶ALKBH5 mRNA和蛋白的表达,降低m6 A甲基化水平,抑制GSK3β、Beclin-1、Atg5的表达,增加mTOR的表达(P<0.01).结论 速效救心丸可以有效减轻缺氧/复氧心肌损伤,其机制可能是通过ALKBH5/m6 A途径抑制过度自噬.
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