【摘 要】
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目的:探讨在结直肠癌细胞中PDZ结合激酶(PDZ binding kinase,PBK)/T-淋巴因子激活的杀伤细胞来源的蛋白激酶(T-cell-originated protein kinase,TOPK)能否通过影响糖酵解关键酶表达改变放射敏感性.方法:通过慢病毒转染敲低LS174T细胞中的PBK/TOPK表达水平.利用克隆形成实验检测细胞的放射敏感性,Real time-PCR和Western blot检测PBK/TOPK、葡萄糖转运蛋白1(glucose transporter 1,GLUT1)和
【机 构】
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内蒙古医科大学附属医院放疗科,内蒙古 呼和浩特 010050
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目的:探讨在结直肠癌细胞中PDZ结合激酶(PDZ binding kinase,PBK)/T-淋巴因子激活的杀伤细胞来源的蛋白激酶(T-cell-originated protein kinase,TOPK)能否通过影响糖酵解关键酶表达改变放射敏感性.方法:通过慢病毒转染敲低LS174T细胞中的PBK/TOPK表达水平.利用克隆形成实验检测细胞的放射敏感性,Real time-PCR和Western blot检测PBK/TOPK、葡萄糖转运蛋白1(glucose transporter 1,GLUT1)和己糖激酶(hexokinase 2,HK2)在RNA水平和蛋白水平的表达差异.结果:与对照组比较,敲低PBK/TOPK的表达后细胞克隆形成集落较小较少.通过Western blot和Real time-PCR实验发现:单纯给予8 Gy照射后,细胞中GLUT1相对表达量至48 h最低,72 h呈现升高趋势;HK2相对表达量则呈现完全相反的变化,在48 h表达量最高;PBK/TOPK单纯敲低组,GLUT1相对表达量至48 h最低,72 h呈现升高趋势,HK2相对表达量则呈现完全相反的变化,48 h表达量最高;敲低PBK/TOPK联合8 Gy照射组中,GLUT1相对表达量在48 h内呈现升高趋势,并于48 h达到顶峰,72 h出现降低趋势,而HK2相对表达量的变化为随着时间逐渐降低.结论:敲低PBK/TOPK能够增强结直肠癌细胞放射敏感性,其机制可能与糖酵解关键酶GLUT1及HK2的表达呈现完全相反的变化有关.
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