【摘 要】
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为探讨circPVT1对瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖和凋亡的影响及分子机制,该实验将瘢痕疙瘩成纤维细胞分为si-NC组、si-circPVT1组、miR-NC组、miR-194-5p组、si-circPVT1+anti-miR-NC组以及si-circPVT1+anti-miR-194-5p组.RT-qPCR检测circPVT1及miR-194-5p的表达情况;四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测细胞活性;流式细胞术检测细胞凋亡;蛋白质印迹(Western blot)法检测蛋白表达;双荧光素酶报告实验检测circ
【机 构】
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泰康仙林鼓楼医院整形外科,南京210000;东部战区总医院秦淮医疗区整形外科,南京210000
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为探讨circPVT1对瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖和凋亡的影响及分子机制,该实验将瘢痕疙瘩成纤维细胞分为si-NC组、si-circPVT1组、miR-NC组、miR-194-5p组、si-circPVT1+anti-miR-NC组以及si-circPVT1+anti-miR-194-5p组.RT-qPCR检测circPVT1及miR-194-5p的表达情况;四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测细胞活性;流式细胞术检测细胞凋亡;蛋白质印迹(Western blot)法检测蛋白表达;双荧光素酶报告实验检测circPVT1和miR-194-5p的靶向关系.结果显示,瘢痕疙瘩成纤维细胞中circPVT1表达水平升高,miR-194-5p表达水平降低(P＜0.05).敲减circPVT1表达或过表达miR-194-5p,瘢痕疙瘩成纤维细胞的活性、CyclinD1、Bcl-2、Caspase-3、PARP的表达均呈显著下降趋势,而细胞凋亡率、Bax和p21表达水平呈显著的上升趋势(P＜0.05).miR-194-5p表达的强弱与circPVT1有关,后者能靶向调控前者;敲减circPVT1表达通过上调miR-194-5p可抑制瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖,促进细胞凋亡.由此得出结论:circPVT1表达下调能刺激miR-194-5p表达,从而抑制瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖,促进细胞凋亡.
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