小鼠表皮Na+、K+-ATP酶的细胞化学定位

来源 :中华物理医学与康复杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:sjtulzhff
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我们将Ersnt的大鼠肾Na+、K+-ATP酶的定位法用于小鼠表皮,并作了改进。①将标本放在含有1~3%甲醛和0.01%戊二醛、pH7.4~7.6的冷固定液中切碎后固定15~20分钟;②将孵化液中SrCl2的浓度改为2.5~3.5 mmol/L,Tris-HCl的浓度改为100 mmol/L,并加入0.25:1(V/V)的DMSO和0.00015%的Triton X-100;③在2%的硝酸铅溶液中加入0.15 mol/L的蔗糖,以使细胞化学反应充分和更好地保存微细结构。经检验,酶的特异性产物均消失。这表明细胞质膜中的P-NPP酶具有依赖Mg2+、需由K+、Na+激活和对乌本苷敏感的特性。P-NPP酶的位置,也就反映了Na+、K+-ATP酶的位置,它分布在生发层(与基底膜接触处除外)和颗粒层细胞的质膜中。

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