【摘 要】
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为建立人原代呼吸道上皮细胞（Human airway epithelial cell, hAEC）的培养方法，并在hAEC体系上探讨3-硫代吲哚类化合物RSV-A-4和免疫抑制剂代谢产物6-MMPr的抗呼吸道合胞病毒（Respiratory syncytial virus, RSV）活性及其机制，从而构建可用于RSV药物筛选及药效评价的细胞模型。采集人呼吸道上皮细胞样本，分离细胞后建立hAEC的培
【基金项目】
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国家自然科学基金项目（81771777）；
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为建立人原代呼吸道上皮细胞（Human airway epithelial cell, hAEC）的培养方法，并在hAEC体系上探讨3-硫代吲哚类化合物RSV-A-4和免疫抑制剂代谢产物6-MMPr的抗呼吸道合胞病毒（Respiratory syncytial virus, RSV）活性及其机制，从而构建可用于RSV药物筛选及药效评价的细胞模型。采集人呼吸道上皮细胞样本，分离细胞后建立hAEC的培养方法，并进行细胞形态和活力鉴定；在hAEC体系上检测小分子化合物RSV-A-4和6-MMPr的抗RSV活性及其细胞毒性；采用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）与Time-of-addition assay技术，探讨RSV-A-4和6-MMPr的抑制RSV复制的作用机制。培养的hAEC经鉴定：其体外培养存活率可达93.51%;RSV-A-4和6-MMPr的半数抑制浓度(Half maximal inhibitory concentration, IC50)分别为（207.30±4.77）μmol/L和（3 191.00±6.11）μmol/L,6-MMPr的半数细胞毒性浓度(Half maximal cytotoxic concentration, CC50)为（95 526.00±10.97）μmol/L,而RSV-A-4对hAEC未见明显细胞毒性；RSV-A-4和6-MMPr均在RSV病毒基因组复制阶段抑制RSV复制。成功建立可用于抗RSV药物筛选及体外评价的hAEC培养体系，RSV-A-4和6-MMPr在细胞水平均能有效抑制RSV复制。
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