日本血吸虫中国大陆株肝期童虫cDNA文库的构建及鉴定

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目的构建日本血吸虫肝期童虫的cDNA文库,以从中寻找新的抗病疫苗和诊断分子.方法阳性钉螺逸出尾蚴,人工感染家兔,15d后剖杀家兔,门静脉灌洗收集童虫.提取其总RNA,并反转录PCR合成cDNA,将cDNA片段定向重组入噬菌体载体,包装后构建成cDNA文库.结果反转录PCR产生的cDNA经电泳,分子量大小位于400~3 500bp之间,经含有IPTG和x-Gal颜色选择平皿测定,初步提示重组效率为90%以上.随机挑取6个重组克隆经自身环化成质粒后双酶切鉴定提示插入片段400~1 200pb不等.结论首次成功
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