【摘 要】
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目的观察胃癌细胞中ASPP2基因与ASPP2基因启动子区域甲基化的表达及调节，探讨其与胃癌的关系。方法Real-time PCR及亚硫酸氢盐测序法检测MKN-45和MGC-803两种胃癌细胞株及正常胃黏膜上皮细胞（GES-1细胞）中ASPP2基因的mRNA表达及启动子区域的甲基化状况；CCK-8法检测经过不同浓度的5-Aza-CdR（分别为：0.5、2.0、8.0、32.0及128.0 μmol/
【机 构】
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上海市奉贤区中心医院放射科 201499,上海健康医学院附属周浦医院肝胆外科 201318,上海市第六人民医院金山分院普外科 201599,上海市第六人民医院金山分院普外科 201599,
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目的观察胃癌细胞中ASPP2基因与ASPP2基因启动子区域甲基化的表达及调节，探讨其与胃癌的关系。
方法Real-time PCR及亚硫酸氢盐测序法检测MKN-45和MGC-803两种胃癌细胞株及正常胃黏膜上皮细胞（GES-1细胞）中ASPP2基因的mRNA表达及启动子区域的甲基化状况；CCK-8法检测经过不同浓度的5-Aza-CdR（分别为：0.5、2.0、8.0、32.0及128.0 μmol/L）处理胃癌细胞后的生长抑制率，去甲基化处理后再次检测两种胃癌细胞中ASPP2基因的mRNA表达和甲基化状况。
结果① MKN-45细胞、MGC-803细胞和GES-1细胞ASPP2 mRNA的相对表达量分别为1.130±0.053、0.993±0.051及2.121±0.047，MKN-45细胞及MGC-803细胞较GES-1细胞均显著降低，差异有统计学意义（P<0.01）；两种胃癌细胞株ASPP2 mRNA的相对表达量相比，差异无统计学意义（P>0.05）。② MKN-45细胞、MGC-803细胞和GES-1细胞ASPP2的甲基化率分别为（11.73±0.69）%、（2.39±0.25）%、（1.92±0.15）%，MKN-45细胞较GES-1细胞显著升高，差异有统计学意义（P<0.01）；MGC-803细胞较GES-1细胞差异无统计学意义（P>0.05）；MKN-45细胞较MGC-803细胞显著升高，差异有统计学意义（P<0.01）。③在同一作用时间下，MKN-45细胞及MGC-803细胞各5-Aza-CdR浓度组的生长抑制率随着5-Aza-CdR处理浓度的增加而增加，呈药物浓度依赖性。④经24 μmol/L 5-Aza-CdR处理48 h后，MKN-45细胞、MGC-803细胞ASPP2 mRNA的相对表达量分别为1.842±0.026和1.106±0.043，MKN-45细胞较处理前显著升高，差异有统计学意义（P<0.01），MGC-803细胞较处理前差异无统计学意义（P>0.05）；MKN-45细胞、MGC-803细胞ASPP2的甲基化率分别为（3.60±0.31）%、（2.23±0.11）%，MKN-45细胞较处理前显著降低，差异有统计学意义（P<0.01），MGC-803细胞较处理前差异无统计学意义（P>0.05）。
结论① MKN-45细胞的ASPP2基因启动子区域的异常高甲基化可能是ASPP2基因mRNA表达降低的分子机制。②甲基化抑制剂5-Aza-CdR可抑制胃癌细胞MKN-45、MGC-803的生长；并促进MKN-45细胞ASPP2基因mRNA的表达，ASPP2基因启动子区域的甲基化逆转是其可能的机制。③ ASPP2基因启动子区域的异常高甲基化导致的mRNA表达降低可能与胃癌的发生相关。
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