【摘 要】
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目的常用人血清高丰度蛋白质(high abundant proteins,HAP)去除方法操作较繁且成本高,文中探索建立简便有效的甲醇沉淀法去除人血清HAP。方法用不同体积的甲醇处理血清样品,
【机 构】
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南京师范大学生命科学院; 南京军区南京总医院检验科;
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目的常用人血清高丰度蛋白质(high abundant proteins,HAP)去除方法操作较繁且成本高,文中探索建立简便有效的甲醇沉淀法去除人血清HAP。方法用不同体积的甲醇处理血清样品,然后与原血清样品上样进行十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)分析,并对去除HAP后的样品进行蛋白定量检测。结果 SDS-PAGE显示,经甲醇处理过的血清样品与原血清电泳结果相比,相对分子质量在50 000～80 000间的清蛋白等HAP被明显去除,血清清蛋白平均浓度显著降低,由(47.65±0.35)g/L下降至(1.16±0.08)g/L,去除率达97%以上,占血清总蛋白质比例由65.4%下降为49.3%,其差异具有统计学意义(P<0.01)。同时一些被HAP掩盖的低丰度蛋白质(low abundant proteins,LAP)有所显现和保留。结论甲醇沉淀法可简便有效地去除人血清中清蛋白等HAP,为进一步行血清蛋白质组学分析奠定基础。
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