【摘 要】
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为了获得L-苹果酸高产的谷氨酸棒状杆菌(C.glutamicum),通过基因编辑,在草酰乙酸回补途径的关键酶丙酮酸羧化酶基因(pyc)前面,敲入超氧化物歧化酶基因启动子(Psod),重组菌株
【基金项目】
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全国大学生创新创业大赛项目(201710488013)的资助,武汉科技大学大学生创新创业大赛项目(201710488013)的资助,湖北大学生物催化与酶工程国家重点实验室开放基金(SKLBEE2018002)的资助
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为了获得L-苹果酸高产的谷氨酸棒状杆菌(C.glutamicum),通过基因编辑,在草酰乙酸回补途径的关键酶丙酮酸羧化酶基因(pyc)前面,敲入超氧化物歧化酶基因启动子(Psod),重组菌株命名为CZM03,通过强启动子Psod增强PYC酶活性,促进丙酮酸→草酰乙酸→苹果酸,利于苹果酸的生成。结果表明:与野生型C.glutamicum相比,重组菌株CZM03的PYC活性上调了约2.2倍;到平台期,两者的生长速率和最大生物量没有显著差异。这表明Psod强启动子的敲入,对菌的生长没有明显影响,但是PYC的酶活
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