【摘 要】
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通过制备原核表达鸡传染性贫血病毒衣壳蛋白(VP1),以进行抗VP1蛋白兔源血清制备。首先以CIAVM9905株基因组DNA为模板,通过PCR扩增N末端截短129个氨基酸的VP1基因片段(VP1Nd12
【机 构】
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徐州医科大学形态学实验教学中心,中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室,徐州医科大学病原生物学与免疫学教研室/江苏省免疫与代谢重点实验室
【基金项目】
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国家肉鸡产业技术体系建设专项(编号:CARS-42-G07);徐州医科大学优秀人才启动基金(编号:D2015004)
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通过制备原核表达鸡传染性贫血病毒衣壳蛋白(VP1),以进行抗VP1蛋白兔源血清制备。首先以CIAVM9905株基因组DNA为模板,通过PCR扩增N末端截短129个氨基酸的VP1基因片段(VP1Nd129),经EcoRⅠ/SalⅠ酶双酶切处理后与经相同酶切处理的pET28a(+)载体连接,获得阳性重组子pET-28a-VP1Nd129,将其转化入E.coliBL21(DE3)菌,经IPTG诱导,表达出VP1Nd129蛋白;后者通过Ni-NTA树脂纯化后,免疫新西兰白兔,制备兔抗血清,用间接免疫荧光试验和We
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