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【摘 要】目的：比较血清免疫固定电泳和免疫球蛋白定量对多发性骨髓瘤的诊断价值。方法：选取48例多发性骨髓瘤患者，同时选取健康体检者22例作为对照组，分别进行血清免疫固定电泳和免疫球蛋白定量检查，分析比较两种检查方法检出率。结果：48例多发性骨髓瘤患者血清免疫球蛋白定量与对照组比较，IgG分型中IgG定量明显升高，IgA及IgM则明显降低，差异均有统计学意义（P<0.05）；IgA分型中IgA定量明显升高，IgG及IgM则明显降低，差异均有统计学意义（P<0.05）；轻链组IgG及IgM定量明显偏低，差异均有统计学意义（P<0.05）。48例多发性骨髓瘤患者经免疫固定电泳检测后，其中45例为阳性，符合率为93.75%。血清免疫固定电泳检出率明显高于免疫球蛋白定量，差异具有统计学意义（χ2=9.846，P=0.002<0.05）。结论：血清免疫固定电泳对多发性骨髓瘤敏感性较免疫球蛋白定量高。
【关键词】免疫固定电泳；免疫球蛋白定量；多发性骨髓瘤
Serum immune fixation electrophoresis and immunoglobulin quantitative value to the diagnosis of multiple myeloma
Zhao Kai shangqiu first people’s hospital clinical laboratory in henan shangqiu， 476100
[Abstract]Objective： To compare the immune serum fixed electrophoresis and immunoglobulin quantitative value to the diagnosis of multiple myeloma. Methods： 48 patients with multiple myeloma， at the same time， select healthy physical examination were 22 cases as control group， respectively for serum immune fixation electrophoresis and immunoglobulin quantitative examination， compared two methods of inspection detection rate. Results： 48 patients with multiple myeloma quantitative compared with control group， serum immunoglobulin IgG quantitative classification of IgG rise obviously， IgA and IgM are significantly reduced， the difference had statistical significance （P < 0.05）； IgA IgA quantitative increased significantly in parting， IgG and IgM are significantly reduced， the difference had statistical significance （P < 0.05）； IgG and IgM quantitative light chain group was obviously lower， differences were statistically significant （P < 0.05）. 48 patients with multiple myeloma after the fixed electrophoretic assays， including 45 cases of positive， coincidence rate was 93.75%. Immune serum fixed electrophoresis inspection was much higher than that of immunoglobulin， quantitative differences statistically significant （chi-square = 9.846， P = 9.846 < 0.05）. Conclusion： Serum fixed electrophoresis quantitative high susceptibility to multiple myeloma is immunoglobulin.
[key words]immune fixed electrophoresis； Immune globulin quantitative； Multiple myeloma
多发性骨髓瘤（MM）是由于浆细胞克隆性增生产生的恶性肿瘤，约占血液系统疾病的10%，并逐渐呈上升趋势，临床表现多样化，贫血、骨痛、低热、感染、肾功能不全等症状较常见[ 1 ]。由于MM患者受累靶器官先后顺序、轻重程度及伴随症状不同，临床表现多样，容易造成漏诊误诊[2]。有研究表明误诊率可达到50%[3]。骨髓瘤细胞可分泌大量异常的单克隆免疫球蛋白（M蛋白），因此检查手段除了骨髓涂片、组织活检之外，血清蛋白电泳和免疫学方法称为确诊MM的重要手段。本文拟通过分别采用血清免疫固定电泳和免疫球蛋白定量对多发性骨髓瘤患者进行检测，以探讨两种方法的诊断价值，现报告如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料
选取商丘市第一人民医院2011年2月至2013年8月收治的48例多发性骨髓瘤患者作为研究对象，均符合多发性骨髓瘤的诊断标准[3]。所有患者中，男性31例，女性17例；年龄为26～72岁，平均（56.03±10.27）岁。另选取同时期健康体检者22例作为对照组，其中男性12例，女性10例；年龄为28～74岁，平均（57.34±11.38）岁。所有受检者均接受血清免疫固定电泳和免疫球蛋白定量检查。 1.2 仪器及试剂
血清免疫球蛋白定量采用MMAGE双光径免疫分析仪LX20（美国Beckman公司）和原装试剂；血清免疫固定电泳检测采用全自动快速电泳分析系统REP（美国Helena公司）和原装试剂。
1.3 检测方法
1.3.1 标本采集：嘱待检者空腹，取静脉血4ml，以3000r/ min离心10min，将血清分离出来。保存于-20℃冰箱内。
1.3.2 血清免疫球蛋白定量：血清置于MMAGE双光径免疫分析仪上，利用速率散射比浊法对IgA、IgM、IgG、λ轻链和κ轻链进行定量检测。
1.3.3 血清免疫固定电泳：患者血清和0.9%氯化钠溶液按照1：5比例混合稀释，每份标本均取17μL在琼脂板上5个不同位置进行点样。根据血清蛋白质电荷的差异经电泳将其分离开。向5条电泳区带中分别依次加入IgA、IgM、IgG、λ和κ抗血清。琼脂板上孵育10min，吸除多余抗血清并且烘干。蛋白固定后，在洗脱液中漂洗电泳胶，清除未结合蛋白，使抗原抗体复合物得以在琼脂板上保留。接着行染色、脱色、烘干，最后扫描并对结果进行观察记录。
1.4 统计学处理
采用SPSS 16.0统计学软件对研究数据进行分析处理，定量资料以均数±标准差形式（x-±s）表示，组间比较采用t检验，定性资料组间比较采用χ2检验，P<0.05为差异具有统计学意义。
2 结果
2.1 血清免疫球蛋白定量结果
48例多发性骨髓瘤患者血清免疫球蛋白定量与对照组比较，IgG分型中IgG定量明显升高，IgA及IgM则明显降低，差异均有统计学意义（P<0.05）；IgA分型中IgA定量明显升高，IgG及IgM则明显降低，差异均有统计学意义（P<0.05）；轻链组IgG及IgM定量明显偏低，差异均有统计学意义（P<0.05）。详见表1。
2.2 血清免疫固定电泳结果
48例多发性骨髓瘤患者经免疫固定电泳检测后，其中45例为阳性，符合率为93.75%，各分型呈明显浓集或卷发状浓染带。45例多发性骨髓瘤阳性患者中，以IgG型最多见，占64.44%（29/45），IgA型占13.33%（6/45），轻链型占22.22%（10/45）。IgGλ型16例，IgGκ型13例；IgAλ型2例，IgA型4例；游离的λ链8例，游离的κ链2例。
2.3 两种方法检出率比较
血清免疫球蛋白定量检出33例，检出率为68.75%；血清免疫固定电泳检出45例，检出率为93.75%。血清免疫固定电泳检出率明显高于免疫球蛋白定量，差异具有统计学意义（χ2=9.846，P=0.002<0.05）。
3 讨论
多发性骨髓瘤的临床表现常不典型，往往表现为骨痛、贫血、红细胞沉降率增快，晚期MM患者可出现肾衰竭等危象，因此，MM的早期诊断极为重要[4]。恶性浆细胞在骨髓内无节制地增殖并产生的单克隆免疫球蛋白称为M蛋白，经血清固定电泳M蛋白可分为：IgG、IgA、IgM、IgD、IgE、轻链型、双克隆或多克隆免疫球蛋白型、不分泌型等。随着科学技术发展，免疫电泳技术在生物学、分子生物学和医学领域内广泛应用，称为临床检验和分析研究中不可缺少的技术，免疫固定电泳是灵敏度较高的分离及鉴定蛋白质的方法，具有较强的特异性[5]。免疫固定电泳是应用单克隆抗体检测单克隆免疫球蛋白，检出敏感性为25mg/L[6]，可以检测出含量很少的单克隆成分，早期诊断效果较好。免疫球蛋白定量可明确M蛋白所属免疫球蛋白类别及数量，也是MM诊断较为敏感的方法，但是由于MM患者存在免疫功能障碍，免疫球蛋白定量检测可见一种或者几种增高，而其他几种相应降低。因此单用免疫球蛋白定量不能很好地提示MM，需要免疫固定电泳来鉴别有无单克隆成分存在。
本文采用血清免疫固定电泳和免疫球蛋白定量对多发性骨髓瘤患者进行检测，结果显示，血清免疫球蛋白定量检出率为68.75%，血清免疫固定电泳检出率为93.75%；血清免疫固定电泳检出率明显高于免疫球蛋白定量，差异具有统计学意义（P<0.05）。由此可见，血清免疫固定电泳对多发性骨髓瘤敏感性较免疫球蛋白定量高，具有重要临床应用价值。
参考文献
[1] 张之楠，沈悌.血液诊断与疗效标准[M].2版.北京：科学出版社，1998：373-379.
[2] 孙玲玲，张天彪，纪斌.多发性骨髓瘤肾损害60例诊治及误诊分析[J].中国误诊学杂志，2010，10（15）：3640.
[3] 叶任高， 陆再英. 内科学[M]. 第6版. 北京： 人民卫生出版社， 2005： 631.
[4] 杨璐，徐俊荣，顾兵，等.免疫固定电泳技术对多发性骨髓瘤的分型诊断及预后判断价值[J].检验医学与临床，2011，8（16）：1975-1976.
[5] 章红涛，张艳芳，赵芳，等.MPV方案治疗难治性复发性多发性骨髓瘤18例临床观察[J].实用癌症杂志，2010，25（1）：71-72.
[6] 董喜环.免疫固定电泳技术在多发性骨髓瘤诊断中的价值[J].国际检验医学杂志，2007，28（10）：902.
【关键词】免疫固定电泳；免疫球蛋白定量；多发性骨髓瘤
Serum immune fixation electrophoresis and immunoglobulin quantitative value to the diagnosis of multiple myeloma
Zhao Kai shangqiu first people’s hospital clinical laboratory in henan shangqiu， 476100
[Abstract]Objective： To compare the immune serum fixed electrophoresis and immunoglobulin quantitative value to the diagnosis of multiple myeloma. Methods： 48 patients with multiple myeloma， at the same time， select healthy physical examination were 22 cases as control group， respectively for serum immune fixation electrophoresis and immunoglobulin quantitative examination， compared two methods of inspection detection rate. Results： 48 patients with multiple myeloma quantitative compared with control group， serum immunoglobulin IgG quantitative classification of IgG rise obviously， IgA and IgM are significantly reduced， the difference had statistical significance （P < 0.05）； IgA IgA quantitative increased significantly in parting， IgG and IgM are significantly reduced， the difference had statistical significance （P < 0.05）； IgG and IgM quantitative light chain group was obviously lower， differences were statistically significant （P < 0.05）. 48 patients with multiple myeloma after the fixed electrophoretic assays， including 45 cases of positive， coincidence rate was 93.75%. Immune serum fixed electrophoresis inspection was much higher than that of immunoglobulin， quantitative differences statistically significant （chi-square = 9.846， P = 9.846 < 0.05）. Conclusion： Serum fixed electrophoresis quantitative high susceptibility to multiple myeloma is immunoglobulin.
[key words]immune fixed electrophoresis； Immune globulin quantitative； Multiple myeloma
多发性骨髓瘤（MM）是由于浆细胞克隆性增生产生的恶性肿瘤，约占血液系统疾病的10%，并逐渐呈上升趋势，临床表现多样化，贫血、骨痛、低热、感染、肾功能不全等症状较常见[ 1 ]。由于MM患者受累靶器官先后顺序、轻重程度及伴随症状不同，临床表现多样，容易造成漏诊误诊[2]。有研究表明误诊率可达到50%[3]。骨髓瘤细胞可分泌大量异常的单克隆免疫球蛋白（M蛋白），因此检查手段除了骨髓涂片、组织活检之外，血清蛋白电泳和免疫学方法称为确诊MM的重要手段。本文拟通过分别采用血清免疫固定电泳和免疫球蛋白定量对多发性骨髓瘤患者进行检测，以探讨两种方法的诊断价值，现报告如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料
选取商丘市第一人民医院2011年2月至2013年8月收治的48例多发性骨髓瘤患者作为研究对象，均符合多发性骨髓瘤的诊断标准[3]。所有患者中，男性31例，女性17例；年龄为26～72岁，平均（56.03±10.27）岁。另选取同时期健康体检者22例作为对照组，其中男性12例，女性10例；年龄为28～74岁，平均（57.34±11.38）岁。所有受检者均接受血清免疫固定电泳和免疫球蛋白定量检查。 1.2 仪器及试剂
血清免疫球蛋白定量采用MMAGE双光径免疫分析仪LX20（美国Beckman公司）和原装试剂；血清免疫固定电泳检测采用全自动快速电泳分析系统REP（美国Helena公司）和原装试剂。
1.3 检测方法
1.3.1 标本采集：嘱待检者空腹，取静脉血4ml，以3000r/ min离心10min，将血清分离出来。保存于-20℃冰箱内。
1.3.2 血清免疫球蛋白定量：血清置于MMAGE双光径免疫分析仪上，利用速率散射比浊法对IgA、IgM、IgG、λ轻链和κ轻链进行定量检测。
1.3.3 血清免疫固定电泳：患者血清和0.9%氯化钠溶液按照1：5比例混合稀释，每份标本均取17μL在琼脂板上5个不同位置进行点样。根据血清蛋白质电荷的差异经电泳将其分离开。向5条电泳区带中分别依次加入IgA、IgM、IgG、λ和κ抗血清。琼脂板上孵育10min，吸除多余抗血清并且烘干。蛋白固定后，在洗脱液中漂洗电泳胶，清除未结合蛋白，使抗原抗体复合物得以在琼脂板上保留。接着行染色、脱色、烘干，最后扫描并对结果进行观察记录。
1.4 统计学处理
采用SPSS 16.0统计学软件对研究数据进行分析处理，定量资料以均数±标准差形式（x-±s）表示，组间比较采用t检验，定性资料组间比较采用χ2检验，P<0.05为差异具有统计学意义。
2 结果
2.1 血清免疫球蛋白定量结果
48例多发性骨髓瘤患者血清免疫球蛋白定量与对照组比较，IgG分型中IgG定量明显升高，IgA及IgM则明显降低，差异均有统计学意义（P<0.05）；IgA分型中IgA定量明显升高，IgG及IgM则明显降低，差异均有统计学意义（P<0.05）；轻链组IgG及IgM定量明显偏低，差异均有统计学意义（P<0.05）。详见表1。
2.2 血清免疫固定电泳结果
48例多发性骨髓瘤患者经免疫固定电泳检测后，其中45例为阳性，符合率为93.75%，各分型呈明显浓集或卷发状浓染带。45例多发性骨髓瘤阳性患者中，以IgG型最多见，占64.44%（29/45），IgA型占13.33%（6/45），轻链型占22.22%（10/45）。IgGλ型16例，IgGκ型13例；IgAλ型2例，IgA型4例；游离的λ链8例，游离的κ链2例。
2.3 两种方法检出率比较
血清免疫球蛋白定量检出33例，检出率为68.75%；血清免疫固定电泳检出45例，检出率为93.75%。血清免疫固定电泳检出率明显高于免疫球蛋白定量，差异具有统计学意义（χ2=9.846，P=0.002<0.05）。
3 讨论
多发性骨髓瘤的临床表现常不典型，往往表现为骨痛、贫血、红细胞沉降率增快，晚期MM患者可出现肾衰竭等危象，因此，MM的早期诊断极为重要[4]。恶性浆细胞在骨髓内无节制地增殖并产生的单克隆免疫球蛋白称为M蛋白，经血清固定电泳M蛋白可分为：IgG、IgA、IgM、IgD、IgE、轻链型、双克隆或多克隆免疫球蛋白型、不分泌型等。随着科学技术发展，免疫电泳技术在生物学、分子生物学和医学领域内广泛应用，称为临床检验和分析研究中不可缺少的技术，免疫固定电泳是灵敏度较高的分离及鉴定蛋白质的方法，具有较强的特异性[5]。免疫固定电泳是应用单克隆抗体检测单克隆免疫球蛋白，检出敏感性为25mg/L[6]，可以检测出含量很少的单克隆成分，早期诊断效果较好。免疫球蛋白定量可明确M蛋白所属免疫球蛋白类别及数量，也是MM诊断较为敏感的方法，但是由于MM患者存在免疫功能障碍，免疫球蛋白定量检测可见一种或者几种增高，而其他几种相应降低。因此单用免疫球蛋白定量不能很好地提示MM，需要免疫固定电泳来鉴别有无单克隆成分存在。
本文采用血清免疫固定电泳和免疫球蛋白定量对多发性骨髓瘤患者进行检测，结果显示，血清免疫球蛋白定量检出率为68.75%，血清免疫固定电泳检出率为93.75%；血清免疫固定电泳检出率明显高于免疫球蛋白定量，差异具有统计学意义（P<0.05）。由此可见，血清免疫固定电泳对多发性骨髓瘤敏感性较免疫球蛋白定量高，具有重要临床应用价值。
参考文献
[1] 张之楠，沈悌.血液诊断与疗效标准[M].2版.北京：科学出版社，1998：373-379.
[2] 孙玲玲，张天彪，纪斌.多发性骨髓瘤肾损害60例诊治及误诊分析[J].中国误诊学杂志，2010，10（15）：3640.
[3] 叶任高， 陆再英. 内科学[M]. 第6版. 北京： 人民卫生出版社， 2005： 631.
[4] 杨璐，徐俊荣，顾兵，等.免疫固定电泳技术对多发性骨髓瘤的分型诊断及预后判断价值[J].检验医学与临床，2011，8（16）：1975-1976.
[5] 章红涛，张艳芳，赵芳，等.MPV方案治疗难治性复发性多发性骨髓瘤18例临床观察[J].实用癌症杂志，2010，25（1）：71-72.
[6] 董喜环.免疫固定电泳技术在多发性骨髓瘤诊断中的价值[J].国际检验医学杂志，2007，28（10）：902.