携带人黑色素瘤分化相关基因-7/白细胞介素-24基因的溶瘤腺病毒SG600-IL24选择性促进肝癌细胞凋亡和增殖阻滞

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目的

观察携带人黑色素瘤分化相关基因(MDA)-7/白细胞介素(IL)-24的溶瘤腺病毒SG600-IL24对各种不同转移潜能肝癌细胞HepG2、Hep3B、SMMC7721和正常肝细胞L02的作用。

方法

将携带人MDA-7/IL-24的溶瘤腺病毒SG600-IL24分别感染人肝癌细胞HepG2、Hep3B、SMMC7721和正常肝细胞L02,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、酶联免疫吸附试验(ELISA)、Western blot检测MDA-7/IL-24基因的表达,噻唑蓝(MTT)观察肝癌细胞的生长抑制,Hoechst 33258和流式细胞仪(FCM)检测细胞的凋亡,FCM检测细胞周期。

结果

RT-PCR和Western blot显示MDA-7/IL-24在肝癌细胞和正常肝细胞中高效表达,ELISA提示细胞培养上清液中MDA-7/IL-24蛋白也明显增加。MTT和FCM提示MDA-7/IL-24能明显抑制肝癌细胞的生长[生长抑制率分别为(75.0±2.5)%、(85.0±2.0)%、(86.0±3.5)%,HepG2:F=5.860,Hep3B:F=7.210,SMMC7721:F=7.980,均P=0.000],促进肝癌细胞凋亡[凋亡抑制率分别为(56.5±4.0)%、(34.4±2.0)%、(43.3±2.5)%,HepG2:F=203.400,Hep3B:F=313.200,SMMC7721:F=130.500,均P=0.000],阻滞肝癌细胞在G2/M期[G2/M期阻滞分别为(35.4±4.2)%、(47.3±6.2)%、(40.5±5.0)%],而对正常肝细胞没有明显的促进凋亡和增殖阻滞作用。

结论

溶瘤腺病毒SG600-IL24能选择性杀伤不同转移潜能人肝癌细胞和诱导凋亡,促进肝癌细胞增殖阻滞,而对正常肝细胞无明显促进凋亡和增殖阻滞作用。

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