【摘 要】
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为了制备反应原性良好的非洲猪瘟病毒(ASFV)血清学诊断抗原,根据ASFVp30和p54基因序列,通过大肠杆菌密码子优化后分别体外合成全长的p30和p54基因,利用重叠延伸PCR(SOE-PCR)
【机 构】
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石河子大学动物科技学院,新疆农垦科学院省部共建绵羊遗传改良与健康养殖国家重点实验室,中国农业科学院兰州兽医研究所
【基金项目】
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国家重点研发计划项目(2017YFD0502300),兵团中青年科技创新领军人才计划项目(2016BC001)
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为了制备反应原性良好的非洲猪瘟病毒(ASFV)血清学诊断抗原,根据ASFVp30和p54基因序列,通过大肠杆菌密码子优化后分别体外合成全长的p30和p54基因,利用重叠延伸PCR(SOE-PCR)将2个基因片段串联,构建p30-54融合基因。将构建的融合基因片段克隆入pET-28a(+)表达载体中,构建原核表达载体pET-p30-54,转化至E.coliBL21(DE3)感受态细胞中,用IPTG诱导表达,检测融合蛋白的反应原性,并制备抗该融合蛋白的多克隆抗体。SDS-PAGE检测结果显示,表达的p30-5
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