【摘 要】
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目的:采用不同作用机制化合物研究基于L5178Y细胞体外Pig-a基因突变试验方法.方法:使用不同浓度范围的马兜铃酸Ⅰ ( aristolochic acid Ⅰ,AAI )、N-亚硝基二乙胺(N-nitrosod
【机 构】
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中国食品药品检定研究院国家药物安全评价监测中心,药物非临床安全性评价研究北京市重点实验室,北京 100176
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目的:采用不同作用机制化合物研究基于L5178Y细胞体外Pig-a基因突变试验方法.方法:使用不同浓度范围的马兜铃酸Ⅰ ( aristolochic acid Ⅰ,AAI )、N-亚硝基二乙胺(N-nitrosodiethylamine,NDEA )、甲磺酸甲醋(methyl methanesulfonate,MMS )、环磷酰胺(cyclophosphamide,CP )、秋水仙素(colchicine,COL )、丝裂霉素C ( mitomycin C,MMC )、糖精、乙烯利、苯并芘[benzoa pyrene,B ( a )P ]和4-硝基喹淋-N-氧化物( 4-nitroquinoline N-oxide,4-NQO )共10种化合物,分别与L5178Y细胞作用一段时间后表达8 d,细胞经APC抗CD45与PE抗CD90.2抗体孵育后使用流式细胞术收集100万个细胞并识别表型为CD90-/CD45+突变细胞,并计算突变率.结果:致突变剂AAI、NDEA、MMS、MMC、B ( a) P、4-NQO分别在无或有代谢活化条件下导致L5178Y细胞Pig-a基因突变率显著性升高,而需代谢活化的致突变剂CP、整倍体诱变剂COL、非遗传毒性致癌物乙烯利和糖精的试验结果为阴性.结论:基于L5178Y细胞的体外Pig-a基因突变检测方法可在无及有代谢活化条件下有效检出致突变剂,特异性和可靠性较高,在药物基因突变风险评价及机制研究领域具有不可或缺的价值.
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