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摘 要：目的：实验旨在观察低氧(氧含量12.7％，相对高度4000m)跑台运动后低氧、常氧恢复下大鼠腓肠肌热休克蛋白70(HSP70)基因表达的时程变化。方法：雄性8周龄SD大鼠48只，随机分为低氧运动后即刻组(HE)，低氧运动后低氧恢复ld组(H1)、2d组(H2)、7d组(H7)，低氧运动后常氧恢复1d组(N1)、2d组(N2)、7d组(N7)，以及常氧对照组(C)，每组6只。运动组进行低氧环境下的跑台运动，运动后将运动组大鼠分别处于低氧和常氧恢复环境，对低氧运动后即刻、低氧运动后低氧恢复及常氧氧恢复1d、2d、7d的大鼠右侧腓肠肌取材进行分析，用实时荧光定量RT-PCR法检测HSP70基因表达水平。结果：运动后即刻大鼠腓肠肌中HSP70基因表达显著高于对照组(P<0.05)。低氧恢复过程中，第1d、第2d基因表达上升，且显著高于即刻组(P<0.05)，第7d基因表达显著下降(P<0.05)；常氧恢复过程中，第1d基因表达显著下降(P<0.05)。第2d、第7d基因表达缓慢上升。结论：低氧运动后即刻诱导HSP70基因表达水平升高；低氧恢复过程中HSP70基因高水平表达维持的时间要比常氧恢复组要长。低氧恢复1d，2d组基因表达水平显著高于相应的常氧恢复组，为低氧恢复中维持高浓度蛋白水平奠定物质基础。
关键词：热休克蛋白70；实时荧光定量RT，PCR；基因表达；大鼠；腓肠肌
中图分类号：G804 2 文献标识码：A 文章编号：1007-3612(2010)04-0048-04
研究证实，热休克蛋白70(HSP70)能够抵御机体氧化应激损伤与细胞凋亡。当骨骼肌在运动、氧浓度降低、自由基产生增多等情况下会诱导HSP70表达增加。HSP70与一些基本的细胞功能密切相关，如新合成的蛋白质正确折叠到行使生物学功能的正常结构、蛋白质转运、组装、变形蛋白质的复性等。有很多研究表明运动、低氧能诱导HsP70基因表达发生改变。高住高训、高住低训、低住高训等训练方式是当今运动生理学界研究的热点。本研究旨在观察大鼠进行低氧跑台运动后不同恢复环境下大鼠腓肠肌HSP70基因表达的时程变化，为高住高训、低住高训等低氧训练、运动的深入研究提供动物实验基础。
1 实验材料与方法
1.1 实验对象 雄性SD大鼠，8周龄，48只，体重228～253g，购自北京维通利华实验动物技术有限公司。国家标准啮齿类动物饲料，分笼饲养，自由饮食、进水，室温(22±2)℃，相对湿度30％～60％，自然光照。常压低氧房氧浓度为12.7％，相对高度4000m。
1.2大鼠运动方式与分组 动物随机分为常氧对照组(c)，低氧运动后即刻组(HE)，低氧运动后低氧恢复1d组(HJ)、2d组(H2)、7d组(H7)，低氧运动后常氧恢复1d组(N1)、2d组(N2)、7d组(N7)，每组6只大鼠(n=6)。
正式实验前对所有大鼠(包括对照组C)进行为期3d的常压常氧适应性训练。第4d进行常压低氧环境下的一次性间歇跑台运动。运动组大鼠均采取间歇训练方法，运动方案如下：速度10m/min：运动5min+间歇1min；速度15m/min：运动5min+间歇1min，重复4次；速度20m/min：运动5min，坡度为10°。
1.3 大鼠腓肠肌样本的采集与处理 大鼠称重后，用2％戊巴比妥钠腹腔注射麻醉，剂量每100g体重0.25mL。腹主动脉取血后，速取右侧腓肠肌，切成小块，用锡纸编号、包好，投入液氮中冰冻暂存。取材完成后把腓肠肌标本转移至-80℃冰箱保存，备用。
1.4测试指标与具体测试方法
1.4.1 大鼠腓肠肌mRNA的提取 严格按照mRNA提取试剂盒(RNeasy Fibrous Tissue Mini Kit，No.74704,OlAGEN)进行操作；提取完成后测试mRNA浓度及OD值(Eppendoff)；提取完成后进行反转录，获得cDNA模板。
1.4.2 引物设计
1.4.3 实时荧光定量RT－PCR 用96孔板(General Bioloz-ic)在荧光定量PCR仪(cHROMO 4Tm，Continuous Fluores.cence Detector)中进行扩增定量。采用20uL的反应体系，包含：10×Buffer for DNA P01.2uL，2.5mM dNTP(上海申能博彩生物科技有限公司)2uL，eDNA模板2uL，上游和下游引物各1uL，SYBR Green I荧光染料(sYBl，Biorad)0.5uL，TaqDNA Polymerase(上海申能博彩生物科技有限公司)0.3gL，双蒸水11.2uL。用荧光信号读取软件(Optic.onMomtor 2，03 analysh so,ware)读取扩增过程中的荧光信号。采用18SrRNA作为内标，将内标减去指标所得的ct差值(△Ct)取对数(2△Ct)，进行统计学处理。
1.4.4 扩增过程 94℃孵育02:00min；94℃孵育00：10min；58℃孵育00:30min；72℃孵育00:30min；读板；82％孵育00:01min；读板；到第二步循环34次以上；72℃孵育10:00min；溶解曲线在65℃到95℃之间，每0.3℃读板一次，持续32个循环以上延伸：72℃，10:00min。
1.5 数据统计方法 所有数值均用平均值±标准差形式表示，用统计学分析软件SPSS11.5 for windows进行ANOVA方差分析，显著性水平为P<0.05。
2 结果
2.1 mRNA质量检测结果 浓度：217.875±82.442ug/uL，纯度：OD260/280值为：1.899±0.074，其范围在1.800～2.200之间，表明mRNA达到较高的纯度，符合进行反转录实验的要求。
2.2 不同恢复条件下大鼠腓肠肌HSP70基因表达水平的时程变化荧光定量RT-PCR扩增与溶解曲线。
运动后即刻HSP70基因表达水平显著高于常氧对照组(P<0.05)，常氧恢复第1d、第2d基因表达水平显著低于运动后即刻组(P<0.05)。常氧恢复从第2d开始至第7dHSP70基因表达水平逐步升高，第7 d基因表达恢复到常氧对照组水平。
低氧恢复第1dHSP70基因表达水平显著高于对照组、运动后即刻组(JP<0.05)。低氧恢复第2d基因表达水平继续升高，显著高于对照组、运动后即刻组，但与第1d相比无显著性差异。低氧恢复第7d基因表达水平与低氧恢复第2d相比显著下降(P<0.05)，且下降幅度比较大，显著低于常氧对照组(P<0.05)。低氧恢复1d、2d组基因表达水平显著高于相应的常氧恢复组。
3 讨论
热休克蛋白也称应激蛋白，参与细胞正常的生长、发育过程。当机体受到有害刺激造成组织损伤时，细胞通过改变基因表达方式，下调一些非主要蛋白的基因转录，优先进行HSPs基因转录并翻译成HSPs蛋白，对损伤细胞进行修复，从而维持细胞稳态。
运动强度、运动时间或周期、肌肉类型、刺激类型、性别、恢复时间长短等对HSP70基因表达的影响都是不同的。可能是因为不同的刺激对于不同亚型的HSP70基因起着不同的诱导作用。在运动后不同的恢复条件下，常氧恢复组大鼠腓肠肌中表达增加的HSP70基因亚型在运动后能快速恢复到运动前的水平。在低氧恢复中，虽然没有了运动的刺激，但是仍旧存在着低氧刺激。缺氧可能诱导了HSP70不同的亚型基因继续被转录。长时间保持较高浓度的HSPT0水平对于保护机体组织来说是最重要的。
HSP70基因分为三种亚型：HSP70A(即HSPT0-；HSP70B；HSPTOC(即HSP70-2)。Thomp-son等人对8名被试者(1名男性、7名女性)进行不同方式的一次性运动。被试者上肢进行两组最大自由收缩的离心运动，每组重复25次；下肢进行-10℃下坡跑30min。运动结束后48h对非优势手肱二头肌、非优势腿股外侧肌进行取材；运动前对优势手肱二头肌、优势腿股外侧肌进行取材作为对照。RT-PCR结果显示运动后48h肱二头肌HSP70C基因表达显著性升高。运动后股外侧肌HSPTOB基因表达显著性升高。不同运动方式、不同部位、不同肌纤维类型肌肉中HSP70基因亚型表达不同。
研究人员发现对健康男性被试者进行一次性跑台或自行车运动，在运动过程中、运动后即刻、运动后数小时人股外侧肌肉中HSP70基因转录增加。Puntschart等人研究了一次急性运动后HSP72mRNA表达的变化情况，让5名未经过训练的健康受试者在跑台上做30min无氧阈运动，发现运动后第4min股四头肌中HSP72mRNA浓度增加了4倍，表明一次急性运动就能诱导人骨骼肌细胞中HSP72基因的表达。Febbraio等人对5名被试者进行长时间功率自行车运动，在运动前安静状态下、疲劳时刻对被试者的股外侧肌进行取材。RT-PCR实验结果表明疲劳时刻HSP72mRNA含量与安静状态下相比显著升高。研究表明在长时间运动过程中人体骨骼肌中的HSP72mRNA含量增加，而且骨骼肌中HSP72mRNA增加的同时可利用的糖原显著减少。运动引起体温升高、氧化应激、糖原减少、pH值变化、蛋白质变性等都能诱导HSP70的大量表达。一次急性运动后30min、3h，股四头肌中HSP72mRNA浓度分别增加了5倍、3.5倍，表明一次急性运动后至少3h内持续诱导人骨骼肌细胞中HSP72基因的表达。低氧运动后即刻大鼠腓肠肌中HSP70mRNA表达显著增加，与上述研究结果相一致。
常氧恢复第1d大鼠腓肠肌中HSP70基因表达下降，与Morton等人的研究结果一致。运动后即刻mRNA浓度高，在恢复过程中基因表达水平出现下降，可能是由于机体去除刺激后mRNA降解速率快于其转录的速率。研究中常氧恢复2d组大鼠腓肠肌中HSP70基因表达有所上升，但无显著性差异。常氧恢复第2d大鼠腓肠肌中HSP70基因表达开始出现上升现象，第7恢复到对照组水平。
低氧刺激能够诱导不同组织HSPT0的表达。Patel等人对肝癌细胞进行低氧暴露，Northern blot结果显示低氧刺激使HSP70mRNA显著性增加。Turman等人对人肾脏近曲小管内皮细胞进行低氧暴露12h，常氧恢复24h后进行Northern blot检测，常氧恢复后24h HSP70基因表达显著增加。Cheng等人对新出生3d的小猪进行30min的低氧处理(氧浓度3％)，在低氧处理后3h、6h、24h取小猪大脑进行免疫组化分析。实验结果表明，低氧处理组小猪大脑中HSP70阳性细胞数目显著高于对照组。当把小鼠暴露于相当于7000m高原的模拟环境下24h，对照组小鼠生活在平原环境下24h。急性剧烈的低氧刺激后对小鼠骨骼肌进行检测，结果表明急性剧烈低氧24h组小鼠骨骼肌中HSP70(178.7％)的表达与对照组相比显著增。
低氧恢复第1dHSP70基因表达与运动后即刻组相比继续增加。Magalhaes等人认为急性缺氧暴露会在不同的组织水平上引起氧化还原系统不同程度的紊乱。低氧环境下机体氧化应激增加，氧化应激能诱导HSP70的表达。分离出来的大鼠心脏用自由基生成系统如黄嘌呤氧化酶、玫瑰红、H2O2处理15min，然后去除刺激恢复30min，心脏中HSP70 mRNA表达量分别增加13倍(黄嘌呤氧化酶处理)、6到7倍(玫瑰红处理)、5倍(H22O2处理)。结果证实氧化应激能直接增加大鼠心脏中HSPT0mRNA的表达。低氧恢复第2d基因表达继续增加；HSP70基因表达的持续增高为维持高浓度的HSP70mRNA水平准备了物质前提。低氧恢复1d、2d组基因表达水平显著高于相应的常氧恢复组。运动后低氧恢复组缺氧应激继续存在，HSP70在骨骼肌恢复与重塑／适应中起主要作用。陈佩杰等人研究指出运动造成肌细胞HSP72mRNA的表达增加，长时间规律性运动可使HSP72mRNA表达在细胞中积累，但一定时间后HSP72mRNA累积速度会逐渐减慢。低氧恢复组第7 d基因表达水平开始下降，长时间低氧刺激与规律性运动有类似作用。
4 结论
低氧运动后进行低氧恢复过程中HSP70基因高水平表达维持的时间要比常氧恢复组要长。低氧恢复1d、2d组基因表达水平显著高于相应的常氧恢复组，为低氧恢复中维持高浓度蛋白水平奠定物质基础。
本研究第一次观察了在低氧环境下进行间歇跑台运动后不同恢复环境下大鼠腓肠肌HSP70 mRNA表达的时程变化。一次性低氧间歇运动能诱导HSP70基因表达水平升高；低氧恢复过程中HSP70基因高水平表达维持的时间要比常氧恢复要长。运动后恢复过程中低氧(缺氧)对机体刺激继续存在，继续诱导HSP70mRNA高水平表达。低氧恢复至第7d，HSP70mRNA表达水平回落，说明了运动与缺氧对大鼠机体的应激减弱。大鼠已从运动后的应激状态恢复到正常水平，同时适应了低氧环境。在一定程度上提示了进行低氧(缺氧)训练需要一周左右的适应时间。
关键词：热休克蛋白70；实时荧光定量RT，PCR；基因表达；大鼠；腓肠肌
中图分类号：G804 2 文献标识码：A 文章编号：1007-3612(2010)04-0048-04
研究证实，热休克蛋白70(HSP70)能够抵御机体氧化应激损伤与细胞凋亡。当骨骼肌在运动、氧浓度降低、自由基产生增多等情况下会诱导HSP70表达增加。HSP70与一些基本的细胞功能密切相关，如新合成的蛋白质正确折叠到行使生物学功能的正常结构、蛋白质转运、组装、变形蛋白质的复性等。有很多研究表明运动、低氧能诱导HsP70基因表达发生改变。高住高训、高住低训、低住高训等训练方式是当今运动生理学界研究的热点。本研究旨在观察大鼠进行低氧跑台运动后不同恢复环境下大鼠腓肠肌HSP70基因表达的时程变化，为高住高训、低住高训等低氧训练、运动的深入研究提供动物实验基础。
1 实验材料与方法
1.1 实验对象 雄性SD大鼠，8周龄，48只，体重228～253g，购自北京维通利华实验动物技术有限公司。国家标准啮齿类动物饲料，分笼饲养，自由饮食、进水，室温(22±2)℃，相对湿度30％～60％，自然光照。常压低氧房氧浓度为12.7％，相对高度4000m。
1.2大鼠运动方式与分组 动物随机分为常氧对照组(c)，低氧运动后即刻组(HE)，低氧运动后低氧恢复1d组(HJ)、2d组(H2)、7d组(H7)，低氧运动后常氧恢复1d组(N1)、2d组(N2)、7d组(N7)，每组6只大鼠(n=6)。
正式实验前对所有大鼠(包括对照组C)进行为期3d的常压常氧适应性训练。第4d进行常压低氧环境下的一次性间歇跑台运动。运动组大鼠均采取间歇训练方法，运动方案如下：速度10m/min：运动5min+间歇1min；速度15m/min：运动5min+间歇1min，重复4次；速度20m/min：运动5min，坡度为10°。
1.3 大鼠腓肠肌样本的采集与处理 大鼠称重后，用2％戊巴比妥钠腹腔注射麻醉，剂量每100g体重0.25mL。腹主动脉取血后，速取右侧腓肠肌，切成小块，用锡纸编号、包好，投入液氮中冰冻暂存。取材完成后把腓肠肌标本转移至-80℃冰箱保存，备用。
1.4测试指标与具体测试方法
1.4.1 大鼠腓肠肌mRNA的提取 严格按照mRNA提取试剂盒(RNeasy Fibrous Tissue Mini Kit，No.74704,OlAGEN)进行操作；提取完成后测试mRNA浓度及OD值(Eppendoff)；提取完成后进行反转录，获得cDNA模板。
1.4.2 引物设计
1.4.3 实时荧光定量RT－PCR 用96孔板(General Bioloz-ic)在荧光定量PCR仪(cHROMO 4Tm，Continuous Fluores.cence Detector)中进行扩增定量。采用20uL的反应体系，包含：10×Buffer for DNA P01.2uL，2.5mM dNTP(上海申能博彩生物科技有限公司)2uL，eDNA模板2uL，上游和下游引物各1uL，SYBR Green I荧光染料(sYBl，Biorad)0.5uL，TaqDNA Polymerase(上海申能博彩生物科技有限公司)0.3gL，双蒸水11.2uL。用荧光信号读取软件(Optic.onMomtor 2，03 analysh so,ware)读取扩增过程中的荧光信号。采用18SrRNA作为内标，将内标减去指标所得的ct差值(△Ct)取对数(2△Ct)，进行统计学处理。
1.4.4 扩增过程 94℃孵育02:00min；94℃孵育00：10min；58℃孵育00:30min；72℃孵育00:30min；读板；82％孵育00:01min；读板；到第二步循环34次以上；72℃孵育10:00min；溶解曲线在65℃到95℃之间，每0.3℃读板一次，持续32个循环以上延伸：72℃，10:00min。
1.5 数据统计方法 所有数值均用平均值±标准差形式表示，用统计学分析软件SPSS11.5 for windows进行ANOVA方差分析，显著性水平为P<0.05。
2 结果
2.1 mRNA质量检测结果 浓度：217.875±82.442ug/uL，纯度：OD260/280值为：1.899±0.074，其范围在1.800～2.200之间，表明mRNA达到较高的纯度，符合进行反转录实验的要求。
2.2 不同恢复条件下大鼠腓肠肌HSP70基因表达水平的时程变化荧光定量RT-PCR扩增与溶解曲线。
运动后即刻HSP70基因表达水平显著高于常氧对照组(P<0.05)，常氧恢复第1d、第2d基因表达水平显著低于运动后即刻组(P<0.05)。常氧恢复从第2d开始至第7dHSP70基因表达水平逐步升高，第7 d基因表达恢复到常氧对照组水平。
低氧恢复第1dHSP70基因表达水平显著高于对照组、运动后即刻组(JP<0.05)。低氧恢复第2d基因表达水平继续升高，显著高于对照组、运动后即刻组，但与第1d相比无显著性差异。低氧恢复第7d基因表达水平与低氧恢复第2d相比显著下降(P<0.05)，且下降幅度比较大，显著低于常氧对照组(P<0.05)。低氧恢复1d、2d组基因表达水平显著高于相应的常氧恢复组。
3 讨论
热休克蛋白也称应激蛋白，参与细胞正常的生长、发育过程。当机体受到有害刺激造成组织损伤时，细胞通过改变基因表达方式，下调一些非主要蛋白的基因转录，优先进行HSPs基因转录并翻译成HSPs蛋白，对损伤细胞进行修复，从而维持细胞稳态。
运动强度、运动时间或周期、肌肉类型、刺激类型、性别、恢复时间长短等对HSP70基因表达的影响都是不同的。可能是因为不同的刺激对于不同亚型的HSP70基因起着不同的诱导作用。在运动后不同的恢复条件下，常氧恢复组大鼠腓肠肌中表达增加的HSP70基因亚型在运动后能快速恢复到运动前的水平。在低氧恢复中，虽然没有了运动的刺激，但是仍旧存在着低氧刺激。缺氧可能诱导了HSP70不同的亚型基因继续被转录。长时间保持较高浓度的HSPT0水平对于保护机体组织来说是最重要的。
HSP70基因分为三种亚型：HSP70A(即HSPT0-；HSP70B；HSPTOC(即HSP70-2)。Thomp-son等人对8名被试者(1名男性、7名女性)进行不同方式的一次性运动。被试者上肢进行两组最大自由收缩的离心运动，每组重复25次；下肢进行-10℃下坡跑30min。运动结束后48h对非优势手肱二头肌、非优势腿股外侧肌进行取材；运动前对优势手肱二头肌、优势腿股外侧肌进行取材作为对照。RT-PCR结果显示运动后48h肱二头肌HSP70C基因表达显著性升高。运动后股外侧肌HSPTOB基因表达显著性升高。不同运动方式、不同部位、不同肌纤维类型肌肉中HSP70基因亚型表达不同。
研究人员发现对健康男性被试者进行一次性跑台或自行车运动，在运动过程中、运动后即刻、运动后数小时人股外侧肌肉中HSP70基因转录增加。Puntschart等人研究了一次急性运动后HSP72mRNA表达的变化情况，让5名未经过训练的健康受试者在跑台上做30min无氧阈运动，发现运动后第4min股四头肌中HSP72mRNA浓度增加了4倍，表明一次急性运动就能诱导人骨骼肌细胞中HSP72基因的表达。Febbraio等人对5名被试者进行长时间功率自行车运动，在运动前安静状态下、疲劳时刻对被试者的股外侧肌进行取材。RT-PCR实验结果表明疲劳时刻HSP72mRNA含量与安静状态下相比显著升高。研究表明在长时间运动过程中人体骨骼肌中的HSP72mRNA含量增加，而且骨骼肌中HSP72mRNA增加的同时可利用的糖原显著减少。运动引起体温升高、氧化应激、糖原减少、pH值变化、蛋白质变性等都能诱导HSP70的大量表达。一次急性运动后30min、3h，股四头肌中HSP72mRNA浓度分别增加了5倍、3.5倍，表明一次急性运动后至少3h内持续诱导人骨骼肌细胞中HSP72基因的表达。低氧运动后即刻大鼠腓肠肌中HSP70mRNA表达显著增加，与上述研究结果相一致。
常氧恢复第1d大鼠腓肠肌中HSP70基因表达下降，与Morton等人的研究结果一致。运动后即刻mRNA浓度高，在恢复过程中基因表达水平出现下降，可能是由于机体去除刺激后mRNA降解速率快于其转录的速率。研究中常氧恢复2d组大鼠腓肠肌中HSP70基因表达有所上升，但无显著性差异。常氧恢复第2d大鼠腓肠肌中HSP70基因表达开始出现上升现象，第7恢复到对照组水平。
低氧刺激能够诱导不同组织HSPT0的表达。Patel等人对肝癌细胞进行低氧暴露，Northern blot结果显示低氧刺激使HSP70mRNA显著性增加。Turman等人对人肾脏近曲小管内皮细胞进行低氧暴露12h，常氧恢复24h后进行Northern blot检测，常氧恢复后24h HSP70基因表达显著增加。Cheng等人对新出生3d的小猪进行30min的低氧处理(氧浓度3％)，在低氧处理后3h、6h、24h取小猪大脑进行免疫组化分析。实验结果表明，低氧处理组小猪大脑中HSP70阳性细胞数目显著高于对照组。当把小鼠暴露于相当于7000m高原的模拟环境下24h，对照组小鼠生活在平原环境下24h。急性剧烈的低氧刺激后对小鼠骨骼肌进行检测，结果表明急性剧烈低氧24h组小鼠骨骼肌中HSP70(178.7％)的表达与对照组相比显著增。
低氧恢复第1dHSP70基因表达与运动后即刻组相比继续增加。Magalhaes等人认为急性缺氧暴露会在不同的组织水平上引起氧化还原系统不同程度的紊乱。低氧环境下机体氧化应激增加，氧化应激能诱导HSP70的表达。分离出来的大鼠心脏用自由基生成系统如黄嘌呤氧化酶、玫瑰红、H2O2处理15min，然后去除刺激恢复30min，心脏中HSP70 mRNA表达量分别增加13倍(黄嘌呤氧化酶处理)、6到7倍(玫瑰红处理)、5倍(H22O2处理)。结果证实氧化应激能直接增加大鼠心脏中HSPT0mRNA的表达。低氧恢复第2d基因表达继续增加；HSP70基因表达的持续增高为维持高浓度的HSP70mRNA水平准备了物质前提。低氧恢复1d、2d组基因表达水平显著高于相应的常氧恢复组。运动后低氧恢复组缺氧应激继续存在，HSP70在骨骼肌恢复与重塑／适应中起主要作用。陈佩杰等人研究指出运动造成肌细胞HSP72mRNA的表达增加，长时间规律性运动可使HSP72mRNA表达在细胞中积累，但一定时间后HSP72mRNA累积速度会逐渐减慢。低氧恢复组第7 d基因表达水平开始下降，长时间低氧刺激与规律性运动有类似作用。
4 结论
低氧运动后进行低氧恢复过程中HSP70基因高水平表达维持的时间要比常氧恢复组要长。低氧恢复1d、2d组基因表达水平显著高于相应的常氧恢复组，为低氧恢复中维持高浓度蛋白水平奠定物质基础。
本研究第一次观察了在低氧环境下进行间歇跑台运动后不同恢复环境下大鼠腓肠肌HSP70 mRNA表达的时程变化。一次性低氧间歇运动能诱导HSP70基因表达水平升高；低氧恢复过程中HSP70基因高水平表达维持的时间要比常氧恢复要长。运动后恢复过程中低氧(缺氧)对机体刺激继续存在，继续诱导HSP70mRNA高水平表达。低氧恢复至第7d，HSP70mRNA表达水平回落，说明了运动与缺氧对大鼠机体的应激减弱。大鼠已从运动后的应激状态恢复到正常水平，同时适应了低氧环境。在一定程度上提示了进行低氧(缺氧)训练需要一周左右的适应时间。