论文部分内容阅读
目的 探讨转化生长因子－β1(transforming growth factor －β1,TGF－β1)/Smad 3信号通路在机械力下调盆底成纤维细胞胶原、弹性蛋白表达中的作用.方法 收集2013年1月至2015年1月于武汉大学人民医院因非盆腔器官脱垂行阴式全子宫切除患者的骶主韧带组织,原代培养成纤维细胞,根据干预因素不同进行如下分组:①对照组:未加力及不添加TGF－β1孵育的细胞爬片细胞;② 机械力组( cyclic mechanical stretch,CMS组):力学参数4 mm 0.5 Hz的机械力加载人盆底成纤维细胞4 h;③TGF－β1组:10 ng/mL TGF－β1孵育人盆底成纤维细胞24 h;④TGF－β1+CMS组:10 ng/mL TGF－β1孵育人盆底成纤维细胞24 h后,力学参数4 mm 0.5 Hz的机械力加载人盆底成纤维细胞4 h.采用Western blot检测各组中TGF－β1、Smad 2/3 (drosophila mothers against decapentaplegic 2/3, Smad 2/3)、磷酸化( phosphorylation,p －) Smad 2、磷酸化(phosphorylation,p－)Smad 3蛋白表达情况.结果 与对照组相比,CMS组TGF－β1、p－Smad 3、I型胶原蛋白A1(Collagen 1A1,COL 1A1)、Ⅲ型胶原蛋白A1(Collagen 3A1,COL 3A1)、弹性蛋白(Elastin)表达明显下调,差异均有统计学意义(P＜0.05),Smad 2/3、p－Smad 2蛋白表达差异无统计学意义(P＞0.05). TGF－β1+CMS组与TGF－β1组相比,p－Smad 3、COL 1A1、COL 3A1、Elastin蛋白表达明显下调,差异均有统计学意义(P＜0.05),Smad 3蛋白表达差异无统计学意义(P＞0.05).与对照组相比,TGF－β1 组COL 1A1、COL 3A1、Elastin、p－Smad 3蛋白表达明显上调,差异均有统计学意义(P＜0.05),Smad 3蛋白表达差异无统计学意义(P＞0.05). TGF－β1+CMS组与CMS组相比,p－Smad 3、COL 1A1、COL 3A1、Elastin蛋白表达明显上调,差异均有统计学意义(P＜0.05),Smad 3蛋白表达差异无统计学意义(P＞0.05).结论 机械力下调盆底成纤维细胞内TGF－β1蛋白表达,抑制Smad 3信号通路磷酸化,从而下调COL 1A1、COL 3A1及Elastin蛋白表达;外源性TGF－β1磷酸化激活Smad 3后可修复机械力对人盆底成纤维细胞ECM代谢损伤.