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目的 探讨高渗刺激下渗透压反应增强子结合蛋白(OREBP)对热休克蛋白(HSP)70的转录调控及对黏液分泌的影响.方法 采用体外堵养的人气道上皮细胞HBE16为实验对象,分时程施加高渗条件,Western印迹检测OREBP和HSP70-2蛋白水平,ELISA检测培养上清黏蛋白(MUC)5AC分泌;进一步构建系列截短和定点突变的HSP70-2启动子荧光素酶报告基因质粒,将其与OREBP的小片段干扰RNA(siRNA)共转染HBE16细胞,求证渗透压反应增强子(ORE)在HSP70-2基因启动子上游的结合位点及对MUC5AC分泌的影响.结果 600 mOsm/L高渗盐水培养HBE16细胞3 h后,OREBP、HSP70-2和培养上清MUC5AC蛋白相对含量分别为(0.54±0.07,0.20±0.08,0.17±0.04),与对照组(0.21±0.05,0.15±0.06,0.13±0.04)相比显著增加到2.57、1.33和1.31倍(均P＜0.05),且随高渗培养时间延长而增加,6 h时分别增加到2.81、3.07、3.77倍(均P＜0.01),9 h时分别增加到3.57、5.13、4.00倍(均P＜0.01),12 h时分别增加到4.24、5.33、4.54倍(均P＜0.01);siRNA抑制OREBP表达48 h后,高渗刺激下的0REBP、HSP70-2和上清MUC5AC蛋白相对含量为(0.36±0.08,0.33±0.08,0.24±0.05),和对照组(0.95±0.27,0.75±0.22,0.58±0.22)相比显著减少(蛋白抑制率分别为62%、56%和59%)(P＜0.05,P＜0.01,P＜0.05);荧光素酶测定表明HSP70-2启动子上游-353至-66区域存在一个关键的ORE位点;定点突变失活-93区域的0RE位点可引起高渗诱导条件下HSP70-2启动子的活性显著降低(P＜0.01).结论 高渗盐水诱导OREBP通过与HSP70-2启动子上-93位ORE结合而激活HSP70-2转录并促进HBE16细胞MUC5AC高分泌.