【摘 要】
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目的 构建携带人肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TRAIL)基因的腺病毒载体,评价TRAIL对人肺癌、肝癌细胞的基因治疗功效.方法构建携带人TRAIL基因的腺病毒Ad-hTRAIL,感染人肺癌细胞株H460、A549,人肝癌细胞株Hep3B、HepGII以及人正常肝细胞株WRL-68,人正常成纤维细胞株MRC-5,通过酶联免疫吸附试验(ELISA)检测hTRAIL的表达,并进行四甲基偶氮唑蓝(MT
【机 构】
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200003,上海,第二军医大学长征医院胸心外科,200003,上海,第二军医大学长征医院胸心外科,第二军医大学东方肝胆外科医院病毒基因治疗实验室,第二军医大学东方肝胆外科医院病毒基因治疗实验室,第二
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目的 构建携带人肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TRAIL)基因的腺病毒载体,评价TRAIL对人肺癌、肝癌细胞的基因治疗功效.方法构建携带人TRAIL基因的腺病毒Ad-hTRAIL,感染人肺癌细胞株H460、A549,人肝癌细胞株Hep3B、HepGII以及人正常肝细胞株WRL-68,人正常成纤维细胞株MRC-5,通过酶联免疫吸附试验(ELISA)检测hTRAIL的表达,并进行四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测其杀伤肿瘤细胞的效能.结果成功构建携带人TRAIL基因的增殖缺陷型腺病毒载体Ad-hTRAIL,感染H460、A549、Hep3B、HepGII、WRL-68细胞,72 h后上清中TRAIL表达量分别为32.75、24.53、34.02、32.89、17.08 μg/L.在MOI=1时,Ad-hTRAIL即可引起肿瘤细胞明显凋亡,而在MOI=100时对正常细胞WRL-68、MRC-5也没有明显杀伤作用.结论腺病毒载体携带人TRAIL基因在肿瘤基因治疗方面有非常广阔的应用前景。
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