羊口疮病毒B2L基因的原核表达、纯化及鉴定

来源 :中国动物检疫 | 被引量 : 0次 | 上传用户：wjp711018

【摘要】

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[目的]获取羊口疮病毒B2L基因编码蛋白。[方法]根据GenBank上羊口疮病毒ORFV/ShanXi/2011/China株B2L基因序列，设计并合成1对特异性引物，利用PCR方法扩增B2L全基因序列，然后将扩

【作者】

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李智仲亮白银荣代兄应海刚张七斤

【机构】

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内蒙古农业大学兽医学院,巴林左旗农畜产品质量安全管理中心

【出处】

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中国动物检疫

【发表日期】

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2017年9期

【关键词】

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羊口疮病毒 B2L基因原核表达

【基金项目】

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国家重点研发计划项目(2017YFD0500900)

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[目的]获取羊口疮病毒B2L基因编码蛋白。[方法]根据GenBank上羊口疮病毒ORFV/ShanXi/2011/China株B2L基因序列，设计并合成1对特异性引物，利用PCR方法扩增B2L全基因序列，然后将扩增的B2L基因克隆到PMD18-T载体上；对构建的重组克隆质粒（PMD18-T-B2L）经过测序鉴定后，将目的基因亚克隆到PET-32a（+）原核表达载体上，获得重组表达质粒PET-32a-B2L，然后通过双酶切和测序进行鉴定；将重组菌于37℃、终浓度含1mMIPTG的LB培养基中，诱导表达3h后

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