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目的
观察富血小板血浆(PRP)复合骨髓间充质干细胞(BMSCs)修复软骨缺损的效果。
方法分离提取兔BMSCs及制取PRP。分别以含PRP的培养基(PRP组)及普通培养基(对照组)培养BMSCs,聚合酶链反应(PCR)检测Ⅰ型胶原、Ⅱ型胶原、性别决定区Y框蛋白9(SOX9)及蛋白多糖(Aggrecan)的基因表达。将45只新西兰兔随机均分为3组,制做软骨缺损的模型。制备PRP-BMSCs凝胶和PRP凝胶,分别填塞于A、B组缺损区,对照组(C组)不予处理。术后12周对标本大体观察、苏木素-伊红(HE)染色、Ⅱ型胶原免疫组织化学染色,评估软骨修复效果。
结果PCR显示,PRP组Ⅱ型胶原、SOX9及Aggrecan的表达(6.592±0.067、6.967±0.062、9.097±0.073)均高于对照组(0.627±0.016、0.817±0.016、0.478±0.016;t=86.450,P<0.05,t=96.412,P<0.05,t=114.801,P<0.05),Ⅰ型胶原表达(0.500±0.009)与对照组(0.523±0.007)差异无统计学意义(t=2.092,P>0.05)。动物模型:A组新生组织与周围整合较好,可见大量软骨细胞,免疫组织化学染色呈强阳性。B组缺损与周围界限清楚,新生软骨细胞较少,免疫组织化学染色呈弱阳性。C组缺损区仍可见凹陷,新生组织主要为纤维组织,免疫组织化学染色呈阴性。
结论PRP能促进BMSCs的体外/体内成软骨分化,PRP-BMSCs可修复动物关节软骨缺损。